果蝇Mef2基因多克隆抗体的制备及检测

来源 :湖南师范大学自然科学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dantezb

【摘要】

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为了在果蝇模型中进一步研究Mef2基因的功能，制备了Mef2多克隆抗体．以果蝇eDNA文库为模板，PCR扩增出亲水性和特异性均好的果蝇Mef2基因片段，将其克隆入pET-28a原核表达载体，然后将

【作者】

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朱玲徐腊梅盛立翔吴秀山莫小阳

【机构】

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湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心

【出处】

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湖南师范大学自然科学学报

【发表日期】

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2012年5期

【关键词】

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Mef2 原核表达多克隆抗体 Mef2 prokaryotic expression polyclonal antibody

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为了在果蝇模型中进一步研究Mef2基因的功能，制备了Mef2多克隆抗体．以果蝇eDNA文库为模板，PCR扩增出亲水性和特异性均好的果蝇Mef2基因片段，将其克隆入pET-28a原核表达载体，然后将重组质粒转化人大肠杆菌菌株Rossetea，用IPTG诱导表达融合蛋白．融合蛋白先经Ni-IDA凝胶柱纯化，再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，然后用不同浓度的抗体分别进行Western-blot实验检测抗体效价．所得结果显示获得了较高效价的果蝇Mef2多克隆抗体．．

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