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目的:在毕赤酵母(Pichia pastoris)中高效表达AβPP中的Kunitz型蛋白酶抑制剂的结构域(KPI/AβPP),利用80L的发酵罐优化发酵条件,制备rhKPI/AβSPP。方法:克隆kpi基因插入到pPICZα,构建真核表达载体pPICZμ-kpi,经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X-33,筛选高表达rhKPI/AβPP工程菌。结果:筛选出的高表达工程菌采用80L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵,在pH3.3、纯氧浓度22%~30%、罐内压力为12psi、甲醇诱导60h时产量1.0g