【摘 要】
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目的 探讨miR-671-5 p调控非小细胞肺癌细胞系增殖、迁移和侵袭的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞系(A549和H460)中miR-671-5p及其靶基因Kruppel样锌指转录因子6(KLF6)mRNA表达量.miR-671-5p mimic转染A549和H460细胞,设置阴性对照序列,蛋白质印迹法检测KLF6蛋白表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法、EdU法和Transwell小室法分别检测非小细胞肺癌细胞的增殖
【机 构】
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中山大学附属第八医院胸心外科,广东 深圳 518033;深圳市疾病预防和控制中心免疫规划科,广东 深圳 518055
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目的 探讨miR-671-5 p调控非小细胞肺癌细胞系增殖、迁移和侵袭的作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)和非小细胞肺癌细胞系(A549和H460)中miR-671-5p及其靶基因Kruppel样锌指转录因子6(KLF6)mRNA表达量.miR-671-5p mimic转染A549和H460细胞,设置阴性对照序列,蛋白质印迹法检测KLF6蛋白表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)法、EdU法和Transwell小室法分别检测非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力.结果 与BEAS-2B细胞比较,miR-671-5p在A549和H460细胞中高表达,表达量分别为1.646±0.026和1.638±0.027,差异有统计学意义,F=153.900,P<0.001;KLF6在A549和H460中的mRNA表达量降低,分别为0.233±0.005和0.382±0.003,差异有统计学意义,F=2077.000,P<0.001;转染miR-671-5p mimic后,A549和H460细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强(均P<0.05),KLF6的mRNA和蛋白表达水平受到抑制,其中A549和H460细胞KLF6蛋白水平分别下调至0.252±0.011(t=23.970,P<0.001)和0.290±0.017(t=16.140,P<0.001).结论 miR-671-5p可能通过调控KLF6基因促进非小细胞肺癌细胞系的增殖、迁移及侵袭,进而影响非小细胞肺癌的发生和发展.
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