植酸酶phyC基因表达载体的构建及其在E.coli中的表达

来源 :生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mrchenbx

【摘要】

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以phyC-PUC18-T为模板,扩增出枯草芽孢杆菌中性植酸酶phyC基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定及序列测定后重组人谷胱甘肽s-转移酶融合表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌JM109,重

【作者】

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邹立扣王红宁吴琦赵海霞

【机构】

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四川农业大学动物预防医学生物工程实验室,四川,雅安,625014四川农业大学都江堰分校资源环境系,四川,成都,611830;四川农业大学动物预防医学生物工程实验室,四川,雅安,625014;四川大学生

【出处】

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生物技术

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

：

枯草芽孢杆菌 phyC基因中性植酸酶表达载体 E.coli

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以phyC-PUC18-T为模板,扩增出枯草芽孢杆菌中性植酸酶phyC基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定及序列测定后重组人谷胱甘肽s-转移酶融合表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌JM109,重组质粒在宿主JM109中有较好的稳定性,在无选择压力条件下传代45次基本保持稳定,0.1mmIPTG诱导后酶活测定结果表明,表达产物具有生物学活性.SDS-PAGE电泳结果显示出明显的特异性表达条带,相对分子量(Mr)为69kD,30℃诱导3h后,表达的目的蛋白量占菌体总蛋白的47.4%.

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