PCR系统制备地高辛标记的探针检测脊髓灰质炎病毒核酸

来源 :中华流行病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ibm__1235
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笔者应用聚合酶链反应(PCR)合成系统,以逆转录的SabinⅠ、Ⅱ、Ⅲ型病毒cDNA为模板,在反应液中加入标记的Dig-dUTP,经扩增制备了地高辛配基标记的脊髓灰质炎病毒cDNA探针、该法比PCR扩增产物后,电泳,片段回收到标记、提纯,常需3天。结果比较PCR技术直接制备地高辛标记cDNA探针方便,快速,标记率高,用于型别鉴定比中和试验快,敏感,特异性强等优点。 Using polymerase chain reaction (PCR) synthesis system, the reverse transcription of the cDNA of Sabin Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ virus as a template, the reaction was added labeled Dig-dUTP, amplified by digoxigenin-labeled Poliovirus cDNA probe, the method than PCR amplification products, electrophoresis, fragments recovered to mark, purification, usually takes 3 days. Results Compared with PCR technology, digoxigenin labeled cDNA probe can be prepared easily, rapidly and with high labeling rate. It is more suitable for type identification than neutralization test, sensitive and specific.
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