【摘 要】
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目的 :探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞活化过程中细胞周期蛋白D3(cyclin D3)、周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)11p58的表达、亚细胞
【机 构】
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南通大学医学院微生物学系,南通大学医学院基础医学研究室,南通大学医学院免疫学系,南通市中医院骨科
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目的 :探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导星形胶质细胞活化过程中细胞周期蛋白D3(cyclin D3)、周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)11p58的表达、亚细胞定位及相互作用。方法:LPS刺激体外培养大鼠星形胶质细胞,采用Western Blot技术检测过程中cyclin D3及CDK11p58蛋白的表达情况;用免疫共沉淀技术分析LPS刺激前后cyclin D3及CDK11p58形成复合物的情况;用免疫荧光双标技术检测二者的亚细胞定位情况;将cyclin D3真核表达载体转染入星形胶质细胞,用核浆分离技术分析过表达cyclin D3对于CDK11p58亚细胞定位影响。结果:LPS呈浓度依赖性上调星形胶质细胞内cyclin D3及CDK11p58蛋白表达;cyclin D3与CDK11p58可形成复合物,LPS刺激增强二者相互作用;静息状态下星形胶质细胞内cyclin D3及CDK11p58均主要位于细胞核,但在细胞质内亦有不同程度表达,LPS刺激后二者均向细胞核聚集,且出现明显细胞核内共定位;过表达cyclin D3可促进CDK11p58向细胞核转运。结论:LPS可刺激大鼠星形胶质细胞内cyclin D3及CDK11p58蛋白表达;cyclin D3通过与CDK11p58相互作用,促进CDK11p58细胞核转运,从而参与星形胶质细胞活化过程。
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