论文部分内容阅读
目的：构建基于新月柄杆菌RsaA外运机制的以大肠杆菌为宿主的原核胞外分泌表达载体系统。方法：利用分子克隆手段，按RsaA分泌系统操纵子组织方式，将RsaA系统外运功能基因配合以异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒。以绿色荧光蛋白（GFP）为报告分子、大肠杆菌M15为宿主茵，诱导表达后通过Western Blotting检测培养上清中GFP的表达。结果：获得了与设计完全一致的pQABPS载体，利用该载体系统，在培养上清中报告分子GFP的表达明显增加，且是通过特异的RsaA外运机制被分泌至胞外的，而非渗漏表达