【摘 要】
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目的研究人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)在人卵泡液的长时间刺激下能否转分化为卵泡样结构。方法在前期实验结果基础上,体外分离培养hAECs,5%人卵泡
【机 构】
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四川大学华西第二医院妇产科,出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室(四川大学),陕西省人民医院,
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目的研究人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)在人卵泡液的长时间刺激下能否转分化为卵泡样结构。方法在前期实验结果基础上,体外分离培养hAECs,5%人卵泡液为诱导条件,延长诱导时间至44d,倒置显微镜观察细胞形态学改变,化学发光免疫技术检测培养基上清液中雌激素(estradiol,E2)水平的变化,实时荧光定量-聚合酶链式反应(real time-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测雌性生殖细胞特异性基因(GDF9、DAZL、SCP3)表达情况。结果诱导组(添加有5%卵泡液的培养基)在培养第10天出现卵母细胞样细胞(OLCs),随着时间延长,OLCs体积增大,周围见透明带样环变,随后减小,部分消失;对照组无上述现象。诱导组DAZL及GDF9的mRNA表达水平较对照组升高(P<0.05),并且具有两个高峰;诱导组SCP3mRNA表达水平与对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。诱导组有E2生成,其水平随时间先下降后升高再下降;对照组无E2生成。结论在体外,hAECs具有向卵泡样结构转分化的潜能。
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