海灰翅夜蛾核型多角体病毒P49蛋白的表达及其抑制细胞凋亡的机制

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一个新克隆的海灰翅夜蛾核型多角体病毒(SlNPV)的p49基因可抑制病毒感染引起的昆虫细胞Sf9的凋亡.用杆状病毒表达系统表达的P49蛋白的氨基酸序列与推导的氨基酸序列一致,证明p49基因编码序列经克隆后能够正确表达.体内标记显示,p49基因在感染早期及晚期均可表达,以多角体基因启动子驱动p49基因的表达只是在晚期,但表达量明显高于WtSlNPV合成的P49蛋白.研究结果证实,SlNPV的p49基因像其他杆状病毒的凋亡抑制基因(p35)一样也是一个早期基因,但在晚期也可表达,与多角体基因启动子比较,p49基因的启动子是一个较弱的启动子.P49蛋白在体外可被人Caspase及家蚕Caspase所切割,切割后均产生约10和40ku的2个片段.P49蛋白又可明显抑制人Caspase-3及家蚕Caspase对其特异底物的切割,证明P49蛋白的凋亡抑制机制与下游Caspase有关.
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