【摘 要】
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目的 探讨不同模式的血流切应力对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）Pim1表达的影响，以及对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）Ser1177和Ser633位点磷酸化的调控作用。方法 体外原代培养的HUVECs,采用平行平板流动腔系统给HUVECs分别施加15 dyn/cm~2层流切应力（LSS）和（0.5±4）dyn/cm~2振荡切应力（OSS）,Western blotting法检测Pim1、Akt和
【基金项目】
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国家自然科学基金（31670961）； 湖北医药学院研究生科技创新项目（YC2020030）;湖北医药学院“十四五”湖北省高等学校优势特色学科群（现代医学）项目（2022XKQY4）；
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目的 探讨不同模式的血流切应力对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）Pim1表达的影响，以及对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）Ser1177和Ser633位点磷酸化的调控作用。方法 体外原代培养的HUVECs,采用平行平板流动腔系统给HUVECs分别施加15 dyn/cm~2层流切应力（LSS）和（0.5±4）dyn/cm~2振荡切应力（OSS）,Western blotting法检测Pim1、Akt和Akt Ser473磷酸化、eNOS、eNOS Ser1177和Ser633位点磷酸化蛋白表达。用特异性小干扰RNA（siRNA）技术分别敲低HUVECs中Pim1和Akt进行干预。结果 与OSS刺激相比较，LSS显著上调HUVECs中Pim1蛋白表达水平（P＜0.01）,同时，Akt Ser473磷酸化、eNOS Ser633和Ser1177位点磷酸化蛋白表达增加（P＜0.05或P＜0.01）; siPim1和Pim1特异性抑制剂SMI-4a干预后，LSS诱导的Pim1蛋白表达显著被抑制（P＜0.05）,同时Akt Ser473磷酸化、eNOS Ser633和Ser1177位点磷酸化蛋白表达均降低（P＜0.05或P＜0.01）。敲低Akt, LSS诱导的Akt Ser473磷酸化蛋白表达显著被抑制（P＜0.05）,同时也显著抑制LSS上调的eNOS Ser633和Ser1177磷酸化蛋白表达（P＜0.05）,而对LSS上调的Pim1表达无影响（P＞0.05）。结论 切应力可以通过Pim1/Akt信号通路调节HUVECs eNOS Ser633和Ser1177位点磷酸化。
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