【摘 要】
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目的 探讨一个相对直接、简洁的方法分离、培养、纯化大鼠的骨髓间充质干细胞.方法 使用贴壁法分离大鼠的骨髓间充质干细胞,通过培养初期的频繁换液和传代过程中减少胰蛋白酶
【机 构】
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西安交通大学第三附属医院(陕西省人民医院)肿瘤外科,陕西西安710068延安大学,医学院,陕西延安716000;西安交通大学第三附属医院(陕西省人民医院)肿瘤外科,陕西西安,710068;西安交通大学
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目的 探讨一个相对直接、简洁的方法分离、培养、纯化大鼠的骨髓间充质干细胞.方法 使用贴壁法分离大鼠的骨髓间充质干细胞,通过培养初期的频繁换液和传代过程中减少胰蛋白酶的暴露时间,达到骨髓间充质干细胞的纯化.使用流式细胞仪检测细胞表面标志物,MTT法检测细胞生长状况,暴露于不同的诱导培养基使细胞成骨、成脂,并向肝胆系分化.结果 分离所得的细胞阳性表达CD29, CD44,CD90,而对于造血细胞标志物CD45呈阴性.在成骨、成脂培养基的诱导下,细胞ALP、茜素红、油红O染色均呈阳性,并发现传至10代的细胞仍保持分化功能.我们将骨髓间充质干细胞贯续暴露于不同的细胞因子和激素,得到了表达肝细胞、胆管上皮细胞特异标志的子代细胞.结论 通过改良后的方法可以高效、简洁地分离出形态均一地大鼠骨髓间充质干细胞,并能够向多胚层的细胞分化.
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