温郁金RAPD-PCR反应体系建立及条件优化

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在提取纯化温郁金DNA的基础上,利用PCR扩增技术,对Mg2+、dNTP、模板DNA、引物、Taq聚合酶等反应条件进行优化,建立温郁金基因组DNA的RAPD-PCR最佳反应体系。结果表明:最佳条件是总体积为25μL,其中Mg2+(25mM)2μL,Taq聚合酶(5U/μL)0.3μL,引物浓度(20μM)1.0μL,模板DNA(5ng/μL)1.0μL,dNTP(2.5mM)2.0μL,10×PCRbuffer2.5μL;PCR扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性35s,36℃退火1min
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