【摘 要】
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以马泰勒虫新疆株顶膜抗原1(AMA1)基因为研究对象,通过参考马泰勒虫美国WA株及其他泰勒虫属AMA1基因序列设计引物,PCR扩增目的 基因片段,构建马泰勒虫pGEX-4T-AMA1表达载体后,进行体外原核表达,经SDS-PAGE、Western blot鉴定分析.结果 显示,成功获得马泰勒虫新疆株AMA1基因序列(GenBank登录号:MW346657),基于AMA1基因遗传进化分析显示,马泰勒虫新疆株与马泰勒虫美国WA株进化关系最接近,核酸和氨基酸序列均具有较高保守性;并成功构建AMA1蛋白原核表达载
【机 构】
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新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐830052
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以马泰勒虫新疆株顶膜抗原1(AMA1)基因为研究对象,通过参考马泰勒虫美国WA株及其他泰勒虫属AMA1基因序列设计引物,PCR扩增目的 基因片段,构建马泰勒虫pGEX-4T-AMA1表达载体后,进行体外原核表达,经SDS-PAGE、Western blot鉴定分析.结果 显示,成功获得马泰勒虫新疆株AMA1基因序列(GenBank登录号:MW346657),基于AMA1基因遗传进化分析显示,马泰勒虫新疆株与马泰勒虫美国WA株进化关系最接近,核酸和氨基酸序列均具有较高保守性;并成功构建AMA1蛋白原核表达载体,AMA1融和重组蛋白相对分子质量约为60 kDa;Western blot分析表明,重组蛋白可与马泰勒虫阳性马血清反应;本研究首次获得马泰勒虫新疆株AMA1基因,并成功完成原核表达及鉴定,为进一步探究马泰勒虫入侵细胞机制及疫苗候选抗原的选择提供理论依据.
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分别制备出高可溶性的抗水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)核蛋白纳米抗体VSVNb和重组截短型铁蛋白与抗VSV核蛋白串联的多聚纳米抗体的融合蛋白FnL-VSV,并对融合蛋白VSVNb和FnL-VSV在VSV诊断中的应用进行了初步探索.从羊驼(Vicugna pacos)中获得抗VSV核蛋白的纳米抗体序列,命名为VS-VNb;从激烈火球菌(Pyrococcus furiosus)中分离出来的铁蛋白(encapsulin)进行截短后,和从羊驼中获得的抗VSV核蛋白的纳
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