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摘要：目的 优化金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取物凝胶（简称“金疮小草凝胶”）的基质处方。方法 采用正交设计法，以凝胶剂的外观、涂展性、均匀性及离心性为考察指标，对基质处方中卡波姆-940、甘油、丙二醇、三乙醇胺的加入量进行考察评估。结果 筛选出最佳基质处方：卡波姆-940加入量为0.4%、甘油加入量为10%、丙二醇加入量为2%、三乙醇胺调至pH为5.5～6.0。结论 正交设计法优选的金疮小草凝胶基质处方外观、涂展性、均匀性及稳定性均优。
关键词：金疮小草;正交设计;涂展性;均匀性
【中图分类号】R749 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2019）06-238-02
金疮小草，又名白毛夏枯草，为唇形科筋骨草属植物金疮小草（Ajuga decumbens Thunb.）的干燥全草。味苦、甘，性寒。归肺、肝经，具有清热泻火、解毒消肿功效。主治咽喉肿痛、肺热咳嗽、肺痈、目赤肿痛、痢疾、痔疮、痈肿疔疮、毒蛇咬伤和跌打损伤等症[1]。现代研究表明[2，3]，其对急性、慢性炎症具有很好的抗炎作用。前期体外实验研究结果表明，金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位能显著抑制RAW 264.7细胞的生长，具有明显抗炎作用。现拟将金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位制备成外用凝胶，外用于跌打损伤的抗炎消肿，现通過正交设计法筛选金疮小草凝胶的基质处方，研究结果具体陈述如下。
1 仪器与试剂
pH计（上海仪电科学仪器有限公司，型号：PHS-25），电子天平（常熟市双杰测试仪器厂，型号：JJ224BC），卡波姆-940（山东优索化工科技有限公司，批号：069817001120），甘油（济南杰辉商贸有限公司，批号：2018-07-05），金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位（实验室自制），三乙醇胺（无锡市亚泰联合化工有限公司，批号：2018-11-01），1，3-丙二醇（广州恒滔贸易有限公司，批号：C815HC2TC1），其余试剂为分析纯。
2 实验方法
2.1 凝胶剂的制备 取适量的卡波姆-940撒于适量纯化水表面上，静置，过夜，使其充分吸水溶胀，然后将甘油、1，3-丙二醇和乙醇溶于适量纯化水中，倒入已充分溶胀的卡波姆-940中，搅匀，备用。另取处方量金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位，加乙醇充分搅拌溶解。将其加入已配好的基质中，搅拌均匀，加三乙醇胺，加入纯化水至全量，搅拌溶解，即得。
2.2 正交试验设计 在参考文献资料[4]基础上，选取卡波姆-940加入量（A）、甘油加入量（B）、1，3-丙二醇加入量（C）、三乙醇胺调至pH值（D）为考察因素，各设3个水平，以对凝胶剂基质外观、涂展性、均匀性及离心性为综合考察指标，采用L9（34）正交表进行试验（表1）。
3 实验结果
3.1 凝胶质量评分 参考文献的方法[5]，以凝胶剂的外观性、涂展性、均匀性以及离心性4个关键性质量检查项目作为考察指标。其中外观性状是指凝胶剂表面是否亮泽、光滑平整;涂展性是指使用玻璃棒蘸取凝胶剂进行涂展，在 涂布上的制剂分布均匀，并且在玻璃棒上无粘连;均匀性是指凝胶剂是否细腻均匀，并且有无颗粒状胶团存在;离心性是指分别将各组凝胶以 5000 r·min-1的转速离心20min，观察是否出现分层。每个指标各占 2.5 分，各指标又分为优、良、 中、差 4 个等级，4 个指标共计10分，具体评分标准见表 2，正交筛选的见表3。
3.2 方差分析 对正交设计试验结果进行方差分析，结果见表4。
由表3和表4结果可知，波姆-940、甘油、1，3-丙二醇、三乙醇胺加入量对凝胶剂黏度和涂展性影响大小依次为 B> A>D>C，其中甘油加入量为显著性影响因素。正交实验优选的最佳基质处方为A2B2C2D2，即：0.4%的卡波姆-940、10%甘油、2%1，3-丙二醇、以三乙醇胺调pH值至5.5～6.0。
3.4 验证试验 按照上述优选工艺A2B2C2D2进行3次重复试验，所得3批次凝胶样品外观、涂展性、均匀性及离心性均良好，表明本研究优选的金疮小草凝胶的基质处方可行。
4 讨论
中国药典的制剂通则中对凝胶剂有很多要求，其中明确提出要求均匀、细腻、可涂展、pH值检查等。正交试验设计为高效、快速、经济的多因素试验设计方法，本研究选择具有代表性的外观、涂展性、均匀性及离心性作为考察指标，符合正交试验的均匀分散、齐整可比的特点要求。另验证试验的结果提示采用优选的最佳基础处方制备的金疮小草凝胶在外观、涂展性、均匀性及稳定性方面均实现最优，值得进一步放大中试。
参考文献
[1] 孙占平，桂丽萍，郭远强，等. 金疮小草化学成分的分离与鉴定[J]. 沈阳药科大学学报2012， 29（10）：758-764.
[2] 孙新建，李志浩. 白毛夏枯草的研究进展[J]. 中医药导报，2010，16（3）：102-104
[3] 李明，彭卫华. 白毛夏枯草化学成分与药理作用研究进展[J]. 实用中医药杂志，2012，28（4）：322-323.
[4] 范高福，刘修树，汤洁，等. 正交设计石榴鞣花酸凝胶剂处方配比的研究[J]. 中国现代应用药学，2016，33（12）：1523-1525.
[5] LUO Y Q， Alimjan A， LAI H Z， et al. Formula of punica granatum peel phenols gel by orthogonal design [J]. J Xinjiang Med Univ， 2013，36（6）： 734-735.
基金项目：佛山市医学类科技攻关项目（2016AB001721）
关键词：金疮小草;正交设计;涂展性;均匀性
【中图分类号】R749 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2019）06-238-02
金疮小草，又名白毛夏枯草，为唇形科筋骨草属植物金疮小草（Ajuga decumbens Thunb.）的干燥全草。味苦、甘，性寒。归肺、肝经，具有清热泻火、解毒消肿功效。主治咽喉肿痛、肺热咳嗽、肺痈、目赤肿痛、痢疾、痔疮、痈肿疔疮、毒蛇咬伤和跌打损伤等症[1]。现代研究表明[2，3]，其对急性、慢性炎症具有很好的抗炎作用。前期体外实验研究结果表明，金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位能显著抑制RAW 264.7细胞的生长，具有明显抗炎作用。现拟将金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位制备成外用凝胶，外用于跌打损伤的抗炎消肿，现通過正交设计法筛选金疮小草凝胶的基质处方，研究结果具体陈述如下。
1 仪器与试剂
pH计（上海仪电科学仪器有限公司，型号：PHS-25），电子天平（常熟市双杰测试仪器厂，型号：JJ224BC），卡波姆-940（山东优索化工科技有限公司，批号：069817001120），甘油（济南杰辉商贸有限公司，批号：2018-07-05），金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位（实验室自制），三乙醇胺（无锡市亚泰联合化工有限公司，批号：2018-11-01），1，3-丙二醇（广州恒滔贸易有限公司，批号：C815HC2TC1），其余试剂为分析纯。
2 实验方法
2.1 凝胶剂的制备 取适量的卡波姆-940撒于适量纯化水表面上，静置，过夜，使其充分吸水溶胀，然后将甘油、1，3-丙二醇和乙醇溶于适量纯化水中，倒入已充分溶胀的卡波姆-940中，搅匀，备用。另取处方量金疮小草醇提取物的乙酸乙酯萃取部位，加乙醇充分搅拌溶解。将其加入已配好的基质中，搅拌均匀，加三乙醇胺，加入纯化水至全量，搅拌溶解，即得。
2.2 正交试验设计 在参考文献资料[4]基础上，选取卡波姆-940加入量（A）、甘油加入量（B）、1，3-丙二醇加入量（C）、三乙醇胺调至pH值（D）为考察因素，各设3个水平，以对凝胶剂基质外观、涂展性、均匀性及离心性为综合考察指标，采用L9（34）正交表进行试验（表1）。
3 实验结果
3.1 凝胶质量评分 参考文献的方法[5]，以凝胶剂的外观性、涂展性、均匀性以及离心性4个关键性质量检查项目作为考察指标。其中外观性状是指凝胶剂表面是否亮泽、光滑平整;涂展性是指使用玻璃棒蘸取凝胶剂进行涂展，在 涂布上的制剂分布均匀，并且在玻璃棒上无粘连;均匀性是指凝胶剂是否细腻均匀，并且有无颗粒状胶团存在;离心性是指分别将各组凝胶以 5000 r·min-1的转速离心20min，观察是否出现分层。每个指标各占 2.5 分，各指标又分为优、良、 中、差 4 个等级，4 个指标共计10分，具体评分标准见表 2，正交筛选的见表3。
3.2 方差分析 对正交设计试验结果进行方差分析，结果见表4。
由表3和表4结果可知，波姆-940、甘油、1，3-丙二醇、三乙醇胺加入量对凝胶剂黏度和涂展性影响大小依次为 B> A>D>C，其中甘油加入量为显著性影响因素。正交实验优选的最佳基质处方为A2B2C2D2，即：0.4%的卡波姆-940、10%甘油、2%1，3-丙二醇、以三乙醇胺调pH值至5.5～6.0。
3.4 验证试验 按照上述优选工艺A2B2C2D2进行3次重复试验，所得3批次凝胶样品外观、涂展性、均匀性及离心性均良好，表明本研究优选的金疮小草凝胶的基质处方可行。
4 讨论
中国药典的制剂通则中对凝胶剂有很多要求，其中明确提出要求均匀、细腻、可涂展、pH值检查等。正交试验设计为高效、快速、经济的多因素试验设计方法，本研究选择具有代表性的外观、涂展性、均匀性及离心性作为考察指标，符合正交试验的均匀分散、齐整可比的特点要求。另验证试验的结果提示采用优选的最佳基础处方制备的金疮小草凝胶在外观、涂展性、均匀性及稳定性方面均实现最优，值得进一步放大中试。
参考文献
[1] 孙占平，桂丽萍，郭远强，等. 金疮小草化学成分的分离与鉴定[J]. 沈阳药科大学学报2012， 29（10）：758-764.
[2] 孙新建，李志浩. 白毛夏枯草的研究进展[J]. 中医药导报，2010，16（3）：102-104
[3] 李明，彭卫华. 白毛夏枯草化学成分与药理作用研究进展[J]. 实用中医药杂志，2012，28（4）：322-323.
[4] 范高福，刘修树，汤洁，等. 正交设计石榴鞣花酸凝胶剂处方配比的研究[J]. 中国现代应用药学，2016，33（12）：1523-1525.
[5] LUO Y Q， Alimjan A， LAI H Z， et al. Formula of punica granatum peel phenols gel by orthogonal design [J]. J Xinjiang Med Univ， 2013，36（6）： 734-735.
基金项目：佛山市医学类科技攻关项目（2016AB001721）