定量薄层层析法用于内切β-1,3-葡聚糖酶筛选纯化过程中酶活力测定

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根据寡糖与显色剂反应后的呈色物质在540nm处吸光值强度,建立了一种用于分析水解液中寡糖浓度的定量薄层层析法。应用阴离子交换层析结舍两步分子筛层析技术在β-葡聚糖酶样品(来源于Trichoderma reesei)中纯化得到一种内切β-葡聚糖酶(EndoG,23.6ku),内切酶纯化44.5倍,酶活回收率12.4%。底物特异性及水解产物分析表明该酶属于内切β—1,3-葡聚糖酶,初步分类为EC3.2.1.39。经测定,EndoG降解热凝胶主要生成昆布二糖和昆布三糖,最适反应条件为pH5.0,50℃。由于En
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