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借助形态观察、生理生化指标测定及16SrNDA序列分析,对从土壤中筛选得到的转半糖基β-半乳糖苷酶产生菌进行鉴定,确定其为肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)285。通过单因子试验和正交试验,对该菌株产转半乳糖基β-半乳糖苷酶的培养条件进行优化。优化的发酵条件为:种龄6h,起始pH值7.0,接种量3%,装液量40mL/250mL,30℃下发酵8h。该培养条件下产酶量达7.21U/mL。以0.1mol/L、pH值7.0K3PO4缓冲溶液配制的40%乳糖、20%果糖(w/v)溶液为底物,