梨自交不亲和及其亲和突变品种花柱内S4(SSM4)基因的表达与作用的比较

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提取梨(Pyrus serotina Rehd.)自交不亲和品种"二十世纪"(基因型为S2S4)、自交亲和的突变品种"奥嗄二十世纪"(S2S SM4,SM=Stylar-part mutant;花柱部分突变)及其亲和后代花柱的可溶性蛋白.经等电聚焦电泳(IEF-PAGE)分析表明,"奥嗄二十世纪"及其后代花柱仍存在SSM4蛋白,但其含量逐代减少,同时发现"奥嗄二十世纪"的S SM4基因仅在柱头表达,而"二十世纪"的S4基因表达的部位除了柱头外,还包括花柱上部及花柱下部,且表达量呈现从柱头到花柱下部下降的趋势.S蛋白经等电聚焦电泳的凝胶板进行RNase活性染色处理,也得到相同的结果.从花柱(包括柱头)中纯化出的S蛋白经SDS-PAGE电泳后进行RNase活性染色的结果表明 ,S4与SSM4蛋白的分子量相近(约30 kD),并且均具有RNase活性.进一步以酵母RNA为基质测定的比活性也基本相等,约为275 U·min-1·mg-1蛋白.在离体条件下,上述两种S蛋白(S-RNase)也以相同的程度抑制S4或SSM4花粉发芽及花粉管伸长.研究证明,自交亲和突变品种"奥嗄二十世纪"的SSM4基因也具有原始自交不亲和品种"二十世纪"S4基因的功能.因此,其自交亲和的原因可归结为SSM4基因的表达量较少及 SSM4基因仅在柱头中表达的缘故.
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