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目的:对组织因子途径抑制因子(TFPI)的表达条件和纯化方法进行优化,降低重组蛋白制备成本。方法:应用巴斯德毕赤酵母表达系统进行删重组蛋白的表达,采用不同浓度甲醇进行重组蛋白表达诱导,观察不同pH对重组蛋白活性的影响,应用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析相结合的方法纯化重组蛋白。结果:重组蛋白的表达量达到1.5mg,L培养基。上述蛋白纯化方法所得回收率为43.1%,蛋白纯度大于95%,蛋白活性保持良好。结论:优化后的蛋白表达量比优化前得到明显提高,本研究采用的纯化方法操作简单、耗时短、成本低且