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目的
气道重塑是支气管哮喘(简称哮喘)的主要病理特征之一,它与气道平滑肌细胞迁移和增殖功能密切相关,前列腺素E受体(E-prostanoid,EP)对之有调控功能。本研究通过大鼠哮喘模型构建,评价了哮喘状态下气道平滑肌细胞上EP改变情况,为开发EP类药物治疗哮喘气道重塑方法提供理论依据。
方法20只SD清洁级大鼠,随机分为卵白蛋白激发哮喘组和对照组,28 d后处死,进行组织学检查,分离培养气道平滑肌细胞,用荧光定量PCR测定。
结果大鼠哮喘模型经组织病理学检查符合哮喘气道重塑现象,气道平滑肌细胞RNA纯度A260/280处于1.8~2.0之间,用Oligod Tadaptor作引物进行逆转录反应,以特异miRNAs引物为正向引物,以共同的与adaptor配对的通用引物为反向引物,进行实时荧光定量PCR扩增。用GAPDH作为内参。扩增反应体系为miRNAQ-PCR诊断试剂盒。EP1~4相对表达量(2-△△Ct)在对照组和哮喘组分别为(EP1:4.35±0.18,6.55±1.21;EP2:1.35±0.12, 0.24±1.06;EP3:4.59±1.14,5.89±1.74;EP4:2.89±1.85,1.69±0.44)哮喘组EP2/4显著下降,而EP1显著增高(P< 0.01)。
结论大鼠哮喘模型气道平滑肌细胞上EP2/4减少,和EP1表达增加,这可能是哮喘气道重塑的重要因素。