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目的 探讨miR-101在非小细胞肺癌(NSCLC)增殖中的作用及机制.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测20例NSCLC组织、癌旁组织及NSCLC细胞系A549、H1650、H1975、PC-9和BEAS-2B人正常肺上皮细胞中miR-101的表达.使用miR-101的类似物miR-101-mimic及对照miR-NC分别瞬时转染A549细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期与凋亡;蛋白质印迹法检测SOX2及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9的表达;双荧光素酶实验检测miR-101结合SOX23′-UTR靶向调控SOX2的表达;免疫组化法和qRT-PCR检测NSCLC组织和癌旁组织SOX2的表达;Pearson相关系数分析NSCLC组织SOX2与miR-101表达的相关性.结果 miR-101在10例NSCLC组织和癌旁组织中表达分别为0.29±0.11和0.87±0.08,差异有统计学意义,t=12.54,P<0.0001.A549细胞转染miR-101-mimic和miR-NC后,24 h吸光度(A)值分别为0.43±0.04和0.65±0.05,差异有统计学意义,t=3.033,P=0.0387;48 h A值分别为0.52±0.05和0.76±0.05,差异有统计学意义,t=7.368,P=0.0018.miR-101-mimic转染A549细胞后S期细胞增多,miR-101-mimic组和miR-NC组分别为(23.43±0.90)％和(9.80±1.32)％,差异有统计学意义,t=14.75,P=0.0001.miR-101-mimic转染诱导A549细胞凋亡,miR-101-mimic组和miR-NC组分别为(22.19±1.92)％和(7.58±1.21)％,差异有统计学意义,t=14.23,P=0.0001.凋亡蛋白Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达升高,抗凋亡蛋白Bcl-2降低.双荧光素酶活性实验得到miR-NC+WT、miR-101+WT、miR-NC+MU1、miR-101+MU1、miR-NC+MU2和miR-101+MU2的相对荧光素酶活性分别为1.003±0.025、0.253±0.015、1.017±0.025、0.510±0.006、0.997±0.021和0.417±0.067.与miR-NC+WT相比,miRNA-101+WT组荧光素酶活性降低,差异有统计学意义,t=44.13,P<0.0001;与miR-NC+MU1相比,miRNA-101+MU1组荧光素酶活性降低,差异有统计学意义,t=13.33,P=0.0002;与miR-NC+MU2相比,miR-101+MU2组荧光素酶活性降低,差异有统计学意义,t=14.40,P=0.0001;与miR-101+WT相比,miR-101+MU1组荧光素酶活性升高,差异有统计学意义;与miR-101+WT相比,miR-101+MU2组荧光素酶活性升高,差异有统计学意义,t=4.14,P=0.0144.Real-time PCR检测结果显示,miR-101有效降低SOX2 mRNA的表达水平,miR-101-mimic组和miR-NC组相对表达量值分别为1.331±0.069和0.537±0.034,差异有统计学意义,t=17.72,P<0.0001.蛋白质印迹法检测SOX2蛋白表达亦得到过表达miR-101降低SOX2蛋白的表达,SOX2在肺癌组织及癌旁组织阳性率分别为80.0％(16/20)和25.0％(5/20),差异有统计学意义,χ2=12.13,P=0.0005.SOX2 mRNA在肺癌组织和癌旁组织的相对表达量相比为0.267±0.018和0.894±0.347;差异有统计学意义,t=5.705,P<0.0001.肺癌组织SOX2表达与miR-101表达高度负相关,R2=0.9354.结论 miR-101可以有效抑制肺癌A549细胞增殖,介导细胞凋亡,其可能的作用机制为靶向抑制SOX2的表达.