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胞内钙离子信号做为第二信使参与植物抗病信号转导途径。以甜菜叶片为试验材料，用孵育方法将Ca^2＋荧光探针Fluo-3／AM载入甜菜细胞中，并结合激光共聚焦扫描显微技术，研究甜菜叶片胞质游离Ca^2＋的测定方法。结果表明，采用20μmol·L^-1。的钙离子荧光指示剂Fluo-3／AM装载顺次进行低温4℃孵育120rain，25℃孵育120min，可获得较为理想的甜菜叶片胞质游离Ca^2＋染色结果。该方法可用于检测BNYYV侵染甜菜叶片胞质游离钙离子的变化，为研究甜菜BNYVv入侵甜菜后胞内钙信号