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复合RT-PCR检测猪乙脑病毒和猪流感病毒方法的建立

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：MAOMAO1002333141

【摘 要】

：

根据GenBank上已发表的猪乙脑病毒（JEV）的E基因序列和猪流感病毒（SIV）的NP基因序列，设计合成了2对特异引物，分别建立了JEV和SIV的单项RT-PCR诊断方法，通过对扩增条件的筛选，最终成功

【作 者】

：

吕晓丽 崔保安 陈红英 魏战勇 王东方 郭小参 

【机 构】

：

河南农业大学牧医工程学院,河南省动物性食品安全重点实验室

【出 处】

：

华南农业大学学报

【发表日期】

：

2008年4期

【关键词】

：

复合RT-PCR 检测 猪乙脑病毒 猪流感病毒 multiplex RT-PCR assay  detection  japanese encephalitis 

【基金项目】

：

基金项目：“十五”国家食品安全重大攻关专项（2001BA804A30-11）,河南省重大科技攻关项目（0223013800）

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根据GenBank上已发表的猪乙脑病毒（JEV）的E基因序列和猪流感病毒（SIV）的NP基因序列，设计合成了2对特异引物，分别建立了JEV和SIV的单项RT-PCR诊断方法，通过对扩增条件的筛选，最终成功地建立了JEV和SIV的复合RT-PCR诊断方法，利用一次RT-PCR反应，即可同时扩增JEV的349bp和SIV155bp的特异性片段，而猪瘟病毒（HCV）、猪蓝耳病病毒（PRRSV）、正常细胞（PK-15）核酸扩增结果为阴性，对JEV和SIV的最低检出量分别为100和10pg的cDNA．该方法适合对J

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