【摘 要】
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本文应用经两种亲和层析法反复纯化吸收的兔抗小鼠IgE(RAME)建立了检测小鼠抗OA及抗DNP特异性IgE的ELISA方法。纯化的RAME经双扩散,免疫电泳,直接法、间接法和双抗体夹心法EL
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所免疫学研究室,世界卫生组织免疫合作中心
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本文应用经两种亲和层析法反复纯化吸收的兔抗小鼠IgE(RAME)建立了检测小鼠抗OA及抗DNP特异性IgE的ELISA方法。纯化的RAME经双扩散,免疫电泳,直接法、间接法和双抗体夹心法ELISA鉴定证实为IgE特异性,不与正常小鼠血清、小鼠IgG各亚类及IgM起交叉反应。抗OA特异性IgE ELISA的批内和批间变异系数分别为5.2%和8.8%,抗DNP特异性IgE的批内和批间变异系数分别为5.0%和5.3%。ELISA与PCA的相关性分析显示:两种方法在抗DNP特异性IgE检测时相关性良好,相关系数r=0.9506(P<0.001);两种方法在检测抗OA特异性IgE时相关性较差,免疫后第14、28、35天的相关系数分别为r=0.6665(P>0.05)、r=0.7412(P>0.05)和r=0.8541(P<0.01)。结果提示:ELISA在检测抗OA特异性IgE时比抗DNP特异性IgE时更易受到非IgE类Ig的竞争。
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