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探讨基因组DNA甲基化对于细胞氧糖剥夺后复糖复氧(OGD/R)模型脑红蛋白持续表达的影响。
方法以A549细胞株为研究对象,实验组细胞在含10 μmol/L的5-氮杂胞苷完全培养基中培养4 d,而对照组细胞则在完全培养基中培养相同天数,同时行氧糖剥夺处理后,测量不同时间点两组细胞脑红蛋白表达、DNA甲基化转移酶表达、全体DNA甲基化水平及细胞抑制率的变化。
结果相较于对照组,实验组中全体甲基化水平显著下降[6 h:(1.0±0.0)比(2.1±0.3);12 h:(0.9±0.0)比(1.4±0.0);24 h:( 0.9±0.0)比(2.6±0.2);36 h:(0.9±0.0)比(2.9±0.1)],脑红蛋白持续高表达[NGB-PCR 6 h:(3.3±1.1)比(0.4±0.1);12 h:(3.2±0.8)比(0.1±0.1);24 h:(4.6±0.6)比(0.2±0.0);36 h:( 5.1±0.3)比(0.1±0.1)],且在相同时间点实验组细胞抑制率较对照组低[6 h:(10.4±0.5)比(14.1±0.7);12 h:(22.0±1.3)比(35.1±0.5);24 h:(25.7±1.0)比(40.6±1.3);36 h:(30.0±0.8)比(44.4±0.7)],差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组中不同OGD时间点3种甲基化转移酶mRNA表达水平均高于对照组,其中DNMT1及DNMT3B差异有统计学意义(P<0.05),而DNMT3A表达在相同时间点两组对比差异无统计学意义(P>0.05)。
结论在A549细胞株OGD/R模型中,基因组DNA甲基化将导致脑红蛋白的不持续表达,而当使用DNA甲基化抑制剂后能使脑红蛋白表达量升高。