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摘要：随着科学技术的迅猛发展，球转基因作物种植面积连年大幅度增加。转基因食品大量出现，转基因食品到底对人们的健康有没有影响，至今还没有一个定论，世界各国卫生组织机构对其也是广泛关注，因此转基因食品的检测技术便显得尤为重要。本文着重介绍了转基因食品检测技术的基本方法、发展方向和存在的一些问题。
关键词：转基因食品 检测技术 进展转基因食品即利用分子生物学手段，将某些生物的基因转移到其它物种中去，使其出现原物种不具有的性状或产物，以转基因生物为原料生产和加工的食品称为转基因食品，又称基因工程食品或基因修饰食品（简称GM食品）。它将会使我们产生一个全新的食品概念并使饮食文化发生新的变化。现在社会对其的忧虑有二点：通过生物技术产生的新食品成分、食品添加剂对人体健康和生长发育是否有潜在的负面影响；基因食品中的新因基通过食物链和环境释放等途径是否影响自然界生物多性。为满足广大消费者的选择权和知情权，以及出于国际贸易的需要，转基因食品的检测越来越引起各国政府和有关食品监督机构的重视，而各种检测技术也随之发展起来。
一、转基因食品的检测技术
不论是对转基因产品进行标准管理，或是对转基因与非转基因原料的分别输送，对食品中的转基因含量的多少加以限制，转基因原料和食品的检测技术是必不可少的。转基因食品的安全性检验，第一步是对受检产品进行鉴定，以区别转基因食品与非转基因食品，筛选出在遗传分化过程中已失去转基因特性的产品；第二步是对受检产品中导人的基因重组体构成的变异情况进行检测，以确定其表达的忠实性及外源基因对受体生物原基因组表达的影响.当前，国际社会对转基因食品检测采用的技术路线主要有两条.针对外源DNA和针对外源蛋白质进行榆测 ，检测要求已从定性检测提高到定量检测。目前，国内外对转基因食品的检测主要有2种，第一种是建立在以核酸为基础的PCR检验方法，如检测特异插入功能基因DNA的PCR方法、巢式PCR方法、核酸杂交方法，检测特异插入基因表达RNA的RT—PCR方法和核酸杂交方法；第二种是检验外源基因的表达产物一蛋白质的方法如ELISA、免疫层析试纸条方法，检测插入基因表达蛋白功能的生化活性检测方法等。目前以PCR方法灵敏度最高，适用范围最广。但由于抗原抗体反应特异性很高，所以这两项检测技术具有很高的专一性，并且已被证明对于未加工转基因产品的检测是有效的，但检测性能常受到基因表达水平的影响，而表达水平又会受制于植物的生理状态和组织的差异。另外转基因食品中蛋白质很容易在食品加工过程中失活、变性。因此这些因素对ELISA和试纸条法的可靠性、重现性产生很大的制约。
1、以核酸为基础的检测方法
（1）核酸印记法。具体操作是将被检测样品的DNA固定在尼龙膜上，再用带有标记的核酸探针进行杂交，最后通过对标记探针的信号进行检验来确定样品中是否含有转基因DNA片段，这种检验方法的灵敏度是比较低的。
（2）PCR检测法。这一检测方法主要是对目标序列进行扩增，再采取特殊方法对扩增产物进行检验。常见的PCR检测法有定性PCR、复合定性PCR、PCR-ELISA、竞争定量PCR。一是定性PCR。这种检测方法主要是对特异的DNA片段实施PCR扩增，然后将得到的扩增产物用琼脂糖凝胶电泳进行分离，再运用凝胶成像系统对分离状况进行观测，定性PCR的灵敏度非常高。二是复合定性PCR。把两对及其以上的引物放入PCR检测系统之中进行扩增。三是PCR.ELISA。将带有地高辛、生物素标记的引物放入PCR反应系统之中，对目标DNA的序列加以扩增，并且把PCR产生物与固相板上特异性探针相结合，同时放入抗地高辛，使底物产生变色反应，利用酶标仪测出相应的吸光值，再加入标样，描绘出标准曲线，最后利用这一曲线进行半定量分析。四是竞争定量PCR。浓度未知的待测DNA与已知浓度的内标DNA在同一个反应管内进行PCR扩增，并将产物进行琼脂糖凝胶电泳分离，再对电泳所产生的分离产物中的待测DNA与内标DNA的产物条带密度进行相关的线性回归分析，从而得出两种DNA的浓度等值点，以此对待测的DNA浓度进行定量分析。
2、外源蛋白质检测法
（1）蛋白质印迹法。这种检测法主要是依据抗体抗原的差异性与特异性，并且与检测多样化复杂样品中某种蛋白的方法相结合的一种检测方法。蛋白质印迹法是将靶蛋白特异性的非标记性抗体与靶蛋白中的抗原决定簇结合，然后再将蛋白质1251.蛋白A的免疫球蛋白抗体检测已结合上去的抗体。但是蛋白质印迹法并不适用于定量分析，因为考虑到成本问题，以及操作难度问题，也不适用于高通量筛选检测。
（2）ELISA。ELISA检测是把抗体与抗原的反应特异性与酶对底物的高效催化作用有机的结合在一起，依据酶作用于底物之后所产生的显色反应来对转基因成分进行鉴别。这种检测方法具有方便、快捷、成本低的特点，存在的问题有：一是所导入的蛋白质并不是在植物的所有组织中均有表达：二是复杂基质对检测结果构成干扰；三是转基因食品在加工的过程中，部分蛋白质可能会发生降解反应，所以ELISA检测，仅适用于没有加工过的原材料。
（3）免疫试纸条法。与蛋白质印迹法的主要区别是，免疫试纸条法是以硝化纤维来代替聚苯乙烯反应板为固相载体来进行的。检测结果在较短的时间内就能够得出，通常只需要5～10分钟，主要问题是检测的灵敏度不高，且一种免疫试纸条仅能为一种目的蛋白质提高检测，不能对食品具体的转基因品系加以区分。
3、其他检测方法
随着全球经济一体化的发展，各国间贸易往来日益增加，科技信息的频繁交流，食品安全已经跨越国界。某一地区的食品安全问题很有可能波及全球。因而完善转基因食品的安全监管体系，加强我国转基因食品的立法和管理工作，提高食品安全检测技术水平迫在眉睫。目前，许多国家如欧盟、美国、日本等国已要求中国出示非转基因产品证明，且我国每年都要从美国、加拿大、阿根廷、澳大利亚等国进口相当数量的农产品，这些国家正是种植转基因农作物规模较大的国家，现已经从一些没有标识的进口食品中检测出了转基因成分。因此，为了满足进出口国际贸易的要求，对转基因产品进行检测，已显得十分迫切。目前，尚无适用于检测多种转基因成分的方法，还没随着国内外对食品安全问题的持续关注，转基因食品的检测技术在持续不断的更新与发展，检测的水平也不断提高。这里面的近红外波谱技术原本是对谷物进行温度、脂肪含量、淀粉含量以及蛋白质含量进行分析的一种常规办法，而近几年来，这一技术主要应用于对转基因作物的检测领域，它的优势在于检测过程中，不需要对被检测物进行处理，操作简便快捷，且能够实现自动化处理，主要问题是不能够对食品的混合物进行检测。食品企业更是为了使产品走出国门，打入国际市场，站在全球战略的层面上进行考虑，必须加大检测转基因食品的投入与研究。除了要在检测技术上不断更新，不断应用之外，还必须逐步健全我国的转基因食品安全监督运行机制，完善相关的法律制度，才能保证转基因食品检测向着高灵敏度、高品质、低成本的方向发展，进入一个良性环境的状态。
二、转基因食品检测技术的发展方向
近年来，随着转基因食品种类的日益多样化和高产量化，市场中新的转基因食品大量出现。为了合理监控转基因食品，并为转基因产品市场的发展提供出路，未来这个领域的研究将会集中在建立简便、快速、灵敏、精确和高通量的检测方法上。另外，建立法定标准和确定法定标准物也是今后发展的方向。
随着国内外对转基因产品研究的深人以及对转基因产品检测要求的提高，人们要求更准确、快速、简便、高效而且成本低廉的检测技术的问世。朝着高通量、高灵敏度、自动化和低成本化的方向发展。同时，现有的检测技术也需要不断改进以克服自身的缺陷。目前，色谱技术（如HPLC）、毛细管电泳技术和超分支滚环扩增技术在转基因产品的检测方面亦有所应用。总之，转基因食品检测技术的发展趋势应是快速简便、低耗费、适用面广，能满足对已有或新型转基因食品进行快速准确的检测要求，让具有安全保障的转基因食品进入人民餐桌。
关键词：转基因食品 检测技术 进展转基因食品即利用分子生物学手段，将某些生物的基因转移到其它物种中去，使其出现原物种不具有的性状或产物，以转基因生物为原料生产和加工的食品称为转基因食品，又称基因工程食品或基因修饰食品（简称GM食品）。它将会使我们产生一个全新的食品概念并使饮食文化发生新的变化。现在社会对其的忧虑有二点：通过生物技术产生的新食品成分、食品添加剂对人体健康和生长发育是否有潜在的负面影响；基因食品中的新因基通过食物链和环境释放等途径是否影响自然界生物多性。为满足广大消费者的选择权和知情权，以及出于国际贸易的需要，转基因食品的检测越来越引起各国政府和有关食品监督机构的重视，而各种检测技术也随之发展起来。
一、转基因食品的检测技术
不论是对转基因产品进行标准管理，或是对转基因与非转基因原料的分别输送，对食品中的转基因含量的多少加以限制，转基因原料和食品的检测技术是必不可少的。转基因食品的安全性检验，第一步是对受检产品进行鉴定，以区别转基因食品与非转基因食品，筛选出在遗传分化过程中已失去转基因特性的产品；第二步是对受检产品中导人的基因重组体构成的变异情况进行检测，以确定其表达的忠实性及外源基因对受体生物原基因组表达的影响.当前，国际社会对转基因食品检测采用的技术路线主要有两条.针对外源DNA和针对外源蛋白质进行榆测 ，检测要求已从定性检测提高到定量检测。目前，国内外对转基因食品的检测主要有2种，第一种是建立在以核酸为基础的PCR检验方法，如检测特异插入功能基因DNA的PCR方法、巢式PCR方法、核酸杂交方法，检测特异插入基因表达RNA的RT—PCR方法和核酸杂交方法；第二种是检验外源基因的表达产物一蛋白质的方法如ELISA、免疫层析试纸条方法，检测插入基因表达蛋白功能的生化活性检测方法等。目前以PCR方法灵敏度最高，适用范围最广。但由于抗原抗体反应特异性很高，所以这两项检测技术具有很高的专一性，并且已被证明对于未加工转基因产品的检测是有效的，但检测性能常受到基因表达水平的影响，而表达水平又会受制于植物的生理状态和组织的差异。另外转基因食品中蛋白质很容易在食品加工过程中失活、变性。因此这些因素对ELISA和试纸条法的可靠性、重现性产生很大的制约。
1、以核酸为基础的检测方法
（1）核酸印记法。具体操作是将被检测样品的DNA固定在尼龙膜上，再用带有标记的核酸探针进行杂交，最后通过对标记探针的信号进行检验来确定样品中是否含有转基因DNA片段，这种检验方法的灵敏度是比较低的。
（2）PCR检测法。这一检测方法主要是对目标序列进行扩增，再采取特殊方法对扩增产物进行检验。常见的PCR检测法有定性PCR、复合定性PCR、PCR-ELISA、竞争定量PCR。一是定性PCR。这种检测方法主要是对特异的DNA片段实施PCR扩增，然后将得到的扩增产物用琼脂糖凝胶电泳进行分离，再运用凝胶成像系统对分离状况进行观测，定性PCR的灵敏度非常高。二是复合定性PCR。把两对及其以上的引物放入PCR检测系统之中进行扩增。三是PCR.ELISA。将带有地高辛、生物素标记的引物放入PCR反应系统之中，对目标DNA的序列加以扩增，并且把PCR产生物与固相板上特异性探针相结合，同时放入抗地高辛，使底物产生变色反应，利用酶标仪测出相应的吸光值，再加入标样，描绘出标准曲线，最后利用这一曲线进行半定量分析。四是竞争定量PCR。浓度未知的待测DNA与已知浓度的内标DNA在同一个反应管内进行PCR扩增，并将产物进行琼脂糖凝胶电泳分离，再对电泳所产生的分离产物中的待测DNA与内标DNA的产物条带密度进行相关的线性回归分析，从而得出两种DNA的浓度等值点，以此对待测的DNA浓度进行定量分析。
2、外源蛋白质检测法
（1）蛋白质印迹法。这种检测法主要是依据抗体抗原的差异性与特异性，并且与检测多样化复杂样品中某种蛋白的方法相结合的一种检测方法。蛋白质印迹法是将靶蛋白特异性的非标记性抗体与靶蛋白中的抗原决定簇结合，然后再将蛋白质1251.蛋白A的免疫球蛋白抗体检测已结合上去的抗体。但是蛋白质印迹法并不适用于定量分析，因为考虑到成本问题，以及操作难度问题，也不适用于高通量筛选检测。
（2）ELISA。ELISA检测是把抗体与抗原的反应特异性与酶对底物的高效催化作用有机的结合在一起，依据酶作用于底物之后所产生的显色反应来对转基因成分进行鉴别。这种检测方法具有方便、快捷、成本低的特点，存在的问题有：一是所导入的蛋白质并不是在植物的所有组织中均有表达：二是复杂基质对检测结果构成干扰；三是转基因食品在加工的过程中，部分蛋白质可能会发生降解反应，所以ELISA检测，仅适用于没有加工过的原材料。
（3）免疫试纸条法。与蛋白质印迹法的主要区别是，免疫试纸条法是以硝化纤维来代替聚苯乙烯反应板为固相载体来进行的。检测结果在较短的时间内就能够得出，通常只需要5～10分钟，主要问题是检测的灵敏度不高，且一种免疫试纸条仅能为一种目的蛋白质提高检测，不能对食品具体的转基因品系加以区分。
3、其他检测方法
随着全球经济一体化的发展，各国间贸易往来日益增加，科技信息的频繁交流，食品安全已经跨越国界。某一地区的食品安全问题很有可能波及全球。因而完善转基因食品的安全监管体系，加强我国转基因食品的立法和管理工作，提高食品安全检测技术水平迫在眉睫。目前，许多国家如欧盟、美国、日本等国已要求中国出示非转基因产品证明，且我国每年都要从美国、加拿大、阿根廷、澳大利亚等国进口相当数量的农产品，这些国家正是种植转基因农作物规模较大的国家，现已经从一些没有标识的进口食品中检测出了转基因成分。因此，为了满足进出口国际贸易的要求，对转基因产品进行检测，已显得十分迫切。目前，尚无适用于检测多种转基因成分的方法，还没随着国内外对食品安全问题的持续关注，转基因食品的检测技术在持续不断的更新与发展，检测的水平也不断提高。这里面的近红外波谱技术原本是对谷物进行温度、脂肪含量、淀粉含量以及蛋白质含量进行分析的一种常规办法，而近几年来，这一技术主要应用于对转基因作物的检测领域，它的优势在于检测过程中，不需要对被检测物进行处理，操作简便快捷，且能够实现自动化处理，主要问题是不能够对食品的混合物进行检测。食品企业更是为了使产品走出国门，打入国际市场，站在全球战略的层面上进行考虑，必须加大检测转基因食品的投入与研究。除了要在检测技术上不断更新，不断应用之外，还必须逐步健全我国的转基因食品安全监督运行机制，完善相关的法律制度，才能保证转基因食品检测向着高灵敏度、高品质、低成本的方向发展，进入一个良性环境的状态。
二、转基因食品检测技术的发展方向
近年来，随着转基因食品种类的日益多样化和高产量化，市场中新的转基因食品大量出现。为了合理监控转基因食品，并为转基因产品市场的发展提供出路，未来这个领域的研究将会集中在建立简便、快速、灵敏、精确和高通量的检测方法上。另外，建立法定标准和确定法定标准物也是今后发展的方向。
随着国内外对转基因产品研究的深人以及对转基因产品检测要求的提高，人们要求更准确、快速、简便、高效而且成本低廉的检测技术的问世。朝着高通量、高灵敏度、自动化和低成本化的方向发展。同时，现有的检测技术也需要不断改进以克服自身的缺陷。目前，色谱技术（如HPLC）、毛细管电泳技术和超分支滚环扩增技术在转基因产品的检测方面亦有所应用。总之，转基因食品检测技术的发展趋势应是快速简便、低耗费、适用面广，能满足对已有或新型转基因食品进行快速准确的检测要求，让具有安全保障的转基因食品进入人民餐桌。