建立改进的四引物扩增受阻突变体系PCR(T－ARMS－PCR)检测方法，实现单管一次性检测叶酸代谢过程相关的4个单核苷酸多态性(SNP)位点：rs1801133，rs1801131，rs1805087和rs1801394。

方法学建立。于2017年1至4月在河北省儿童医院检验科收集150名体检儿童抗凝全血标本以待验证。利用T－ARMS－PCR原理及多重嵌合引物策略设计rs1801133、rs1801131、rs1805087及rs1801394的特异性内外嵌合引物。通过优化引物浓度和反应条件，经单管PCR反应，结合QIAxcel毛细管电泳分析扩增产物长度，判读150份标本的SNP基因型，同时所有标本经测序法进一步验证。利用SPSS 17.0统计软件卡方检验对150份标本的4个SNP位点分别进行哈迪－温伯格遗传平衡(HWE)检测。

改进的T－ARMS－PCR结合毛细管电泳分析的方法可在3 h内一次性识别本研究中叶酸代谢过程相关的4个SNP位点的8个不同等位基因，可对150份全血标本的SNP位点准确分型，其分型结果与测序法完全相符。4个SNP位点基因型的分布均符合HWE平衡定律(χ_rs1801133²＝0.69, P_rs1801133＝0.40; χ_rs1801131²＝0.21, P_rs1801131＝0.64; χ_rs1805087²＝3.32, P_rs1805087＝0.07; χ_rs1801394²＝1.91, P_rs1801394＝0.17)。

本研究建立的改进的T－ARMS－PCR结合毛细管电泳分析方法，可准确地同时检测叶酸代谢过程相关的4个SNP位点，为指导人群特异性地补充叶酸提供了一种可能的技术手段。(中华检验医学杂志，2017, 40：799－804)