论文部分内容阅读
目的
探讨肝癌细胞来源分泌型自噬体，即一群表达自噬标志LC3B的细胞外囊泡(LC3B extracellular vesicles, LC3B EVs)对CD8 T细胞功能耗竭的影响及其作用机制。
方法流式细胞术检测肝癌患者外周血和腹水中LC3B EVs和PD-1 CD8 T细胞比例并分析二者之间的相关性；分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)，在αCD3/CD28和IL-2培养条件下加入LC3B EVs或经热休克蛋白90α(heat shock protein 90α，HSP90α)封闭抗体封闭后的LC3B EVs体外诱导培养72 h，流式细胞术检测PD-1 CD8 T细胞和IFN-γ CD8 T细胞比例以及上清中IL-2、TNF-α和IFN-γ的浓度。
结果肝癌患者血浆和腹水中LC3B EVs及表达HSP90α的LC3B EVs比例显著高于健康对照组和非癌性腹水组，且与PD-1 CD8 T细胞耗竭比例均呈显著正相关，尤其是HSP90α LC3B EVs。另外，体外人肝癌细胞来源的LC3B EVs可以诱导CD8 T细胞耗竭，当采用HSP90α封闭抗体预封闭LC3B EVs后，CD8 T细胞耗竭比例显著降低。
结论肝癌细胞来源LC3B EVs通过膜结合型HSP90α诱导CD8 T细胞功能耗竭。