【摘 要】
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目的 探讨腺病毒载体转染后对大鼠移植静脉的影响.方法 选用Wistar大鼠间置移植颈静脉于同侧颈总动脉,术后移植静脉行HE染色和VG染色,观测血管内膜厚度.应用免疫组织化学染色
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目的 探讨腺病毒载体转染后对大鼠移植静脉的影响.方法 选用Wistar大鼠间置移植颈静脉于同侧颈总动脉,术后移植静脉行HE染色和VG染色,观测血管内膜厚度.应用免疫组织化学染色,观察血管内膜平滑肌细胞(SMC)内增殖细胞核抗原(PCNA)表达及增殖情况.于倒置荧光显微镜,以紫外光激发观察测定腺病毒转染率.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western蛋白印迹检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平.结果 术后3 d,GFP表达较高;术后10 d,GFP表达有所下降;术后30 d,GFP几乎没有表达.移植术后10 d试验组及对照组可见明显内膜增生.移植术后30 d试验组及对照组内膜增生减轻.试验组及对照组与正常非移植静脉相比,内膜增生明显(P＜0.05),试验组较对照组内膜增生稍明显,但差异无统计学意义.实验中正常静脉平滑肌细胞PCNA阳性细胞极少,对照组与试验组术后10 d,内膜与中膜SMC的PCNA阳性细胞增多,增殖达到高峰.术后30 d中膜SMC的PCNA阳性细胞明显减少.试验组及对照组与正常非移植静脉相比,PCNA阳性细胞增高明显(P＜0.05).试验组较对照组PCNA阳性细胞稍多,但差异无统计学意义.正常静脉ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白表达很少,对照组移植后3 d部分细胞即出现阳性表达,10 d表达最强,30 d仍较高.与正常静脉组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).试验组较对照组表达更高,但与对照组比较,差异无统计学意义.结论 腺病毒载体能高效地进行体内基因转移,作用时间短暂.腺病毒载体促进移植静脉的血管内SMC活化、增多、血管内膜增生、ICAM-1、VCAM-1的表达的增加,腺病毒转染到移植静脉血管壁后产生炎症、内膜增生等效果,混淆了目的基因的效果.
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