高效液相色谱-同位素稀释-串联质谱法测定人源瘦素的含量

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为准确测定人源瘦素的含量,建立了蛋白水解-高效液相色谱-同位素稀释-串联质谱(HPLC-IDMS)测定人源瘦素纯品绝对含量的方法,并对人源瘦素蛋白水解时间进行优化.结果表明,人源瘦素中的被测氨基酸在温度为110℃,6 mol/L HC1溶液中水解40 h可达平衡.水解样品通过高效液相色谱分离后,使用多反应监测模式(MRM)分别检测脯氨酸m/z 116>m/z 70(Pro)和m/z 121>m/z 74(标记Pro)离子对,缬氨酸m/z 118>m/z 72(Val)和m/z 123>m/z 76(标记V
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