【摘 要】
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为了明确不同脑温停循环对大鼠海马线粒体差异蛋白质的影响,探讨深低温停循环的脑保护机制,研究以16G导管和22G留置针分别穿刺颈内静脉和尾动脉,建立大鼠闭胸式体外循环模型.
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为了明确不同脑温停循环对大鼠海马线粒体差异蛋白质的影响,探讨深低温停循环的脑保护机制,研究以16G导管和22G留置针分别穿刺颈内静脉和尾动脉,建立大鼠闭胸式体外循环模型.并在该模型下完成常温(35.5~37.5℃)和深低温(<27℃)状态下停循环10 min,提取海马组织并纯化线粒体,电镜超微结构显示线粒体纯度和完整性均良好,可以进行下一步研究.按照蛋白质组学要求取线粒体蛋白质匀浆,SDSPAGE预实验显示标本符合蛋白质组学的需要.最后进行i-TRAQ标记的蛋白质组学分析,获取7个差异蛋白质(依据表达量>1.5倍或<0.67倍,p<0.05).之后对其中的差异蛋白质——细胞色素C氧化酶进行深入研究,免疫荧光染色精确定性表明线粒体和细胞质的COX蛋白在NTCA和DHCA组间的分布是有差异的,Western-blot半定量分析提示3组之间COX蛋白表达量无明显变化(p>0.05),由此判断急性期深低温停循环的脑保护作用与其减少线粒体蛋白质COX向胞质的释放有关。
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