论文部分内容阅读
为了了解人过氧化氢酶在各种常见肿瘤细胞中的表达情况，构建人过氧化氢酶的原核表达载体，在大肠杆菌中表达、纯化人过氧化氢酶，并进行活性检测．我们通过常规分子克隆手段构建原核表达载体 pET-15b-hCAT，将其转化大肠杆菌Rosetta-gami，经过IPTG诱导，表达产物经超声破碎后用Ni-NTA柱进行亲和层析纯化，用试剂盒检测重组hCAT酶活性，然后检测其对DNA氧化损伤的保护作用．通过荧光定量PCR（qPCR）测定hCAT基因在HLF-1正常细胞与几种常见肿瘤细胞中的表达情况．本研究成功构建了pET-