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摘要
为了明确新疆阿克苏、和田地区不同枣树品种上枣果黑斑病的发生情况和病原菌（Alternaria alternata）对不同枣树品种的致病性差异，本研究采用五点取样法调查了该病害在田间枣树不同品种上的发生情况，并在室内采用菌饼、孢子悬浮液和菌丝等3种接种体对离体枣果进行致病性测定。田间调查结果表明：枣果黑斑病在‘骏枣’和‘壶瓶枣’上发生最为严重，发病率均高于30%；在‘圆脆枣’、‘马牙枣’和‘酸枣’上未发生。室内优选菌饼作为接种体对离体枣果的致病性测定结果显示，病原菌对‘骏枣’、‘壶瓶枣’的致病性最强，病情指数≥40，对‘灰枣’、‘冬枣’、‘赞皇枣’和‘马牙枣’的致病性最弱。研究结果为枣果黑斑病抗病品种的选育提供依据。
关键词
枣果黑斑病；不同品种；发生情况；致病性
中图分类号：
S 436.65
文献标识码：A
DOI：10.3969/j.issn.05291542.2015.05.035
Abstract
The objective of the study is to elucidate the occurrence of jujube black spot and the pathogenicity of Alternaria alternata on different jujube varieties in Aksu and Hetian. The occurrence of jujube black spot on 13 jujube varieties were surveyed by sampling in five locations， and the pathogenicity of A.alternata was investigated by agar disk containing mycelium. The results showed that the occurrence of the disease on ‘Junzao’ and ‘Hupingzao’ were the most severe in the field， with an incidence of more than 30%； the disease did not occur on ‘Yuancuizao’， ‘Mayazao’ and ‘Wild jujube’. The pathogenicity of A.alternata on the fruits of ‘Junzao’ and ‘Hupingzao’ were much stronger， with a disease index ≥40，while the pathogenicity on ‘Huizao’， ‘Dongzao’， ‘Zanhuangzao’ and ‘Mayazao’ were very weak. The results may provide a theoretical basis for the selection of jujube varieties resistant to black spot disease.
Key words
jujube black spot；different varieties；occurrence；pathogenicity
枣（Ziziphus jujuba Mill.）在中国的栽培历史悠久[1]，是我国极具民族特色的果品之一，富含维生素C和人体所需的微量元素，堪称果中佳品。新疆独特的气候条件和丰富的光热资源使得枣树已成为新疆林果业发展中又一新兴产业[2]，种植面积已突破40万hm2，占全国总面积的近1/3，其中阿克苏、喀什、和田、巴州、哈密等地区的枣果产量占到全国总产量的50%以上，红枣产业已成为新疆农民增收致富的支柱型产业。枣果病害的发生影响着红枣产业的健康发展。2010-2013年在新疆阿克苏、和田等地区枣园里枣果黑斑病的发病率达30%[3]，病重枣园发病率高达50%[4]，果农损失惨重。
枣树上的黑斑病于1975年在印度哈里亚纳首次在叶片上发现[5]。1985年，在云南‘毛叶枣’的叶片上发现该病害[6]，随后在‘青枣’[7]、‘冬枣’[8]、‘梨枣’[9]、‘壶瓶枣’和‘骏枣’[10]等枣果上陆续发现该病害。国内目前对于枣果黑斑病研究主要集中在防治上，通过化学方法和生物方法减少该病害造成的损失[1114]。选育和利用抗病品种是防治植物病害最经济、有效的途径[1516]。关于枣果黑斑病菌对新疆不同枣树品种致病性尚未开展过系统的研究。本研究通过对新疆阿克苏、和田地区枣果黑斑病发生情况进行调查，并比较病原菌对不同枣树品种的致病性差异，为枣果黑斑病抗病品种的选育及该病害的综合防治奠定基础。
1材料与方法
1.1供试枣树品种与病原菌
于2014年8-10月，在新疆阿克苏、和田地区的枣园开展枣果黑斑病发生情况调查，同时在实验室完成病原菌对不同枣树品种的致病性测定。供试枣树品种详细信息见表1。
枣果黑斑病病原菌（Alternaria alternata）由新疆农业大学林学与园艺学院病理实验室提供。
1.2枣果黑斑病在田间不同枣树品种上发生情况调查
在样地按照5点取样法，每点选取3株树，共15株，每株按东、南、西、北4个方位，每个方位随机选取5个枣吊，即每株选取20个枣吊，共300个枣吊，统计每个枣吊挂果数量及病果数量，依据病情分级标准[17]，计算病情指数[18]。
1.4接种前枣果的处理
采集不同品种的白熟期的健康枣果，用自来水将枣果表面冲洗干净后再用75%乙醇消毒90 s，无菌水冲洗3次，自然晾干后待用。用灭菌的接种针在枣果的胴部上扎孔，伤口为直径5 mm的圆[19]。 1.5不同接种体对骏枣枣果的致病性测定
在处理好的骏枣的胴部，分别用菌饼和菌丝直接接种，用脱脂棉蘸取孢子悬浮液接种，每处理10个枣果，重复3次。接种后的枣果用保鲜膜包裹置于无菌托盘内，推盘底层为无菌滤纸，注入一定无菌水保湿，将托盘用保鲜膜密封。48 h后去除枣果表面的保鲜膜，十字交叉法测量病斑大小，每天观察病斑变化[20]，通过发病情况和病斑扩展速度筛选最优接种体。
1.6病原菌对不同品种枣果的致病性测定
在不同品种枣果的胴部分别按照1.4的方法处理，以1.5试验筛选出的最佳接种体进行接种，每品种10个枣果，重复3次，以未接病菌的培养基作为对照，保湿方法同1.5，48 h后每天观察枣果上病斑直径的变化情况，直至病斑不再变化，统计病斑面积，计算发病枣果的病情指数。
1.7数据分析
选用Excel和DPS软件包进行数据统计分析，采用Duncan氏新复极差法（P<0.05，P<0.01）进行显著性分析。
2结果与分析
2.1枣果黑斑病菌在不同枣树品种上的发生情况
田间调查发现，枣果黑斑病菌在不同枣树品种上发病情况差异显著，主栽品种上病害发生较为普遍，少数品种未受到危害（表3）。‘骏枣’上病害发病率最高，达34.35%，病情指数为8.34；其次是‘壶瓶枣’，发病率为30.12%，病情指数为4.85；在‘圆脆枣’、‘马牙枣’和‘酸枣’上病害未发生；而在‘灰枣’、‘赞皇枣’、‘冬枣’、‘相枣’、‘板枣’、‘鸡心枣’和‘金丝枣’上发病率和病情指数均较低。
不同地区的同一枣树品种上病害发生情况差异不大。‘骏枣’在阿克苏地区的发病率（34.35%）、病情指数（8.34）略高于和田地区（32.65%/8.26）；‘壶瓶枣’在阿克苏的发病率（30.12%）稍高于和田地区（21.38%），但是病情指数相差不大；不同地区‘灰枣’的发病率以及病情指数相差无几。总体来看，病害在阿克苏地区的发生情况相对和田地区严重，主要由于枣果收获期阿克苏地区的降雨量较和田地区丰富，田间湿度较大，病害的发生相对严重。
2.2病原菌不同类型接种体对骏枣枣果的致病性
采用菌饼、孢子悬浮液和菌丝3种接种体对‘骏枣’枣果开展致病性测定。结果表明不同接种体对枣果的致病性存在差异（图1）。接种菌饼的枣果发病最早，在接种后2 d枣果胴部上出现病斑，接种后10 d病斑停止扩展，直径为17 mm；接种孢子悬浮液的枣果接种后2 d开始发病，病斑扩展较慢，接种后10 d病斑停止扩展，直径为9 mm；接种菌丝的枣果接种后3 d开始表现明显病状，接种10 d病斑后停止扩展，直径为8 mm。采用菌饼接种的枣果发病较快且病斑扩展速度快，故选择菌饼作为最优接种体。
2.3病原菌对不同枣树品种枣果的致病性
病原菌接种于不同品种的枣果上均能致病，且不同品种的枣果发病症状一致，对照不发病。枣果接种2～3 d后开始出现水渍状圆形或椭圆形病斑，病斑逐渐扩大且变黑变硬，病斑内部果肉分离（图2）。病原菌对不同品种的枣果致病性差异显著（表4），致病性依次为：‘骏枣’>‘壶瓶枣’>‘哈密枣’>‘相枣’>‘板枣’>‘酸枣’>‘圆脆枣’>‘鸡心枣’=‘金丝枣’>‘赞皇枣’=‘灰枣’=‘冬枣’=‘马牙枣’；病原菌对‘骏枣’的致病性最强，病情指数为58，其次是‘壶瓶枣’，病情指数为40，对‘马牙枣’、‘灰枣’、‘赞皇枣’和‘冬枣’的致病性最弱，病情指数均为20。
供试枣果中，‘冬枣’、‘鸡心枣’、‘马牙枣’和‘酸枣’在接种后3 d发病，其他枣果在接种后2 d发病；所有供试品种在接种后第10天病斑停止扩展。病原菌在不同品种枣果中的病斑扩展情况存在差异。接种后4～10 d时间段内，‘赞皇枣’、‘鸡心枣’、‘灰枣’、‘圆脆枣’等品种上病斑持续缓慢扩展；‘哈密枣’在接种后4～7 d相对扩展较慢，接种后7～10 d扩展较快；‘骏枣’、‘壶瓶枣’和‘板枣’在接种后4～10 d内持续快速扩展。
3结论与讨论
本研究通过调查不同枣树品种枣果黑斑病的田间发生情况，发现‘骏枣’和‘壶瓶枣’上病害发生较为严重。病原菌对新疆13个枣树品种枣果的致病性测定结果表明，病原菌对‘骏枣’枣果的致病性最强，其次为‘壶瓶枣’，对‘冬枣’和‘马牙枣’的致病性最弱。病害在大果型的枣果上发生严重，小果型品种上相对较轻，可能与不同品种枣果的生理结构有关。
国内学者开展枣果黑斑病相关研究时，多数选用孢子悬浮液和菌饼作为接种体[3，89， 21]。本试验探讨了不同接种体对致病性的影响，结果表明直接在伤口上放置菌饼的接种效果最好。
从已有报道来看，国内红枣产区枣果黑斑病的发生情况不尽相同。山东沾化枣果黑斑病主要侵染‘冬枣’的叶片和果实，其病果率一般在30%，最严重达80%以上[22]。山西太谷县和交城县的‘骏枣’和‘壶瓶枣’上病害发病率在60%左右，严重时达到80%以上[10]。本研究通过对新疆阿克苏和和田地区枣园的调查发现，‘骏枣’和‘壶瓶枣’的发病最为严重，发病率在30%左右，病原菌只危害‘冬枣’的果实，且发病率极低（0.46%）。由此可见，不同地域枣果黑斑病的发生情况差异较大，可能与地区间的气候和地理环境有关[23]。
参考文献
[1]曲泽洲，王永蕙. 中国果树志·枣卷[M]. 北京： 中国农业出版社， 1993： 2332.
[2]漆联全. 新疆红枣产业的现状、要求及其发展趋势[J]. 新疆农业科学，2010（S2）：812.
[3]向征，钟聪慧，胡军，等. 新疆枣果黑斑病病原鉴定[J]. 新疆农业科学，2013（5）：845850.
[4]蔡龙. 红枣黑斑病发病研究及药剂防治试验[J]. 山西果树，2013（3）：35.
[5]Gupta P C， Madaan R L. Diseases of fruits from Haryana—a new leaf spot disease of Ziziphus mauritiana Lamk.[J]. Current Science，1977，46（7）：237238.
[6]刘云龙，张凌祥，张忠义，等.国内一种果树新病害——枣叶黑斑病的初步研究[J].云南农业大学学报，1988（1）：1820.
[7]袁高庆，赖传雅. 台湾大青枣黑斑病和灰霉病发生为害初报[J]. 广西植保，2001（3）：30.
[8]吴玉柱，季延平，刘会香，等.冬枣黑斑病病原菌的鉴定[J]. 中国森林病虫，2005（2）：13.
[9]赵文华，李一泉. 枣树黑斑病在云南省红河州发生的主要症状、病原分析、发生规律及综合防治策略[J]. 石河子大学学报（自然科学版），2004（S1）：152155.
为了明确新疆阿克苏、和田地区不同枣树品种上枣果黑斑病的发生情况和病原菌（Alternaria alternata）对不同枣树品种的致病性差异，本研究采用五点取样法调查了该病害在田间枣树不同品种上的发生情况，并在室内采用菌饼、孢子悬浮液和菌丝等3种接种体对离体枣果进行致病性测定。田间调查结果表明：枣果黑斑病在‘骏枣’和‘壶瓶枣’上发生最为严重，发病率均高于30%；在‘圆脆枣’、‘马牙枣’和‘酸枣’上未发生。室内优选菌饼作为接种体对离体枣果的致病性测定结果显示，病原菌对‘骏枣’、‘壶瓶枣’的致病性最强，病情指数≥40，对‘灰枣’、‘冬枣’、‘赞皇枣’和‘马牙枣’的致病性最弱。研究结果为枣果黑斑病抗病品种的选育提供依据。
关键词
枣果黑斑病；不同品种；发生情况；致病性
中图分类号：
S 436.65
文献标识码：A
DOI：10.3969/j.issn.05291542.2015.05.035
Abstract
The objective of the study is to elucidate the occurrence of jujube black spot and the pathogenicity of Alternaria alternata on different jujube varieties in Aksu and Hetian. The occurrence of jujube black spot on 13 jujube varieties were surveyed by sampling in five locations， and the pathogenicity of A.alternata was investigated by agar disk containing mycelium. The results showed that the occurrence of the disease on ‘Junzao’ and ‘Hupingzao’ were the most severe in the field， with an incidence of more than 30%； the disease did not occur on ‘Yuancuizao’， ‘Mayazao’ and ‘Wild jujube’. The pathogenicity of A.alternata on the fruits of ‘Junzao’ and ‘Hupingzao’ were much stronger， with a disease index ≥40，while the pathogenicity on ‘Huizao’， ‘Dongzao’， ‘Zanhuangzao’ and ‘Mayazao’ were very weak. The results may provide a theoretical basis for the selection of jujube varieties resistant to black spot disease.
Key words
jujube black spot；different varieties；occurrence；pathogenicity
枣（Ziziphus jujuba Mill.）在中国的栽培历史悠久[1]，是我国极具民族特色的果品之一，富含维生素C和人体所需的微量元素，堪称果中佳品。新疆独特的气候条件和丰富的光热资源使得枣树已成为新疆林果业发展中又一新兴产业[2]，种植面积已突破40万hm2，占全国总面积的近1/3，其中阿克苏、喀什、和田、巴州、哈密等地区的枣果产量占到全国总产量的50%以上，红枣产业已成为新疆农民增收致富的支柱型产业。枣果病害的发生影响着红枣产业的健康发展。2010-2013年在新疆阿克苏、和田等地区枣园里枣果黑斑病的发病率达30%[3]，病重枣园发病率高达50%[4]，果农损失惨重。
枣树上的黑斑病于1975年在印度哈里亚纳首次在叶片上发现[5]。1985年，在云南‘毛叶枣’的叶片上发现该病害[6]，随后在‘青枣’[7]、‘冬枣’[8]、‘梨枣’[9]、‘壶瓶枣’和‘骏枣’[10]等枣果上陆续发现该病害。国内目前对于枣果黑斑病研究主要集中在防治上，通过化学方法和生物方法减少该病害造成的损失[1114]。选育和利用抗病品种是防治植物病害最经济、有效的途径[1516]。关于枣果黑斑病菌对新疆不同枣树品种致病性尚未开展过系统的研究。本研究通过对新疆阿克苏、和田地区枣果黑斑病发生情况进行调查，并比较病原菌对不同枣树品种的致病性差异，为枣果黑斑病抗病品种的选育及该病害的综合防治奠定基础。
1材料与方法
1.1供试枣树品种与病原菌
于2014年8-10月，在新疆阿克苏、和田地区的枣园开展枣果黑斑病发生情况调查，同时在实验室完成病原菌对不同枣树品种的致病性测定。供试枣树品种详细信息见表1。
枣果黑斑病病原菌（Alternaria alternata）由新疆农业大学林学与园艺学院病理实验室提供。
1.2枣果黑斑病在田间不同枣树品种上发生情况调查
在样地按照5点取样法，每点选取3株树，共15株，每株按东、南、西、北4个方位，每个方位随机选取5个枣吊，即每株选取20个枣吊，共300个枣吊，统计每个枣吊挂果数量及病果数量，依据病情分级标准[17]，计算病情指数[18]。
1.4接种前枣果的处理
采集不同品种的白熟期的健康枣果，用自来水将枣果表面冲洗干净后再用75%乙醇消毒90 s，无菌水冲洗3次，自然晾干后待用。用灭菌的接种针在枣果的胴部上扎孔，伤口为直径5 mm的圆[19]。 1.5不同接种体对骏枣枣果的致病性测定
在处理好的骏枣的胴部，分别用菌饼和菌丝直接接种，用脱脂棉蘸取孢子悬浮液接种，每处理10个枣果，重复3次。接种后的枣果用保鲜膜包裹置于无菌托盘内，推盘底层为无菌滤纸，注入一定无菌水保湿，将托盘用保鲜膜密封。48 h后去除枣果表面的保鲜膜，十字交叉法测量病斑大小，每天观察病斑变化[20]，通过发病情况和病斑扩展速度筛选最优接种体。
1.6病原菌对不同品种枣果的致病性测定
在不同品种枣果的胴部分别按照1.4的方法处理，以1.5试验筛选出的最佳接种体进行接种，每品种10个枣果，重复3次，以未接病菌的培养基作为对照，保湿方法同1.5，48 h后每天观察枣果上病斑直径的变化情况，直至病斑不再变化，统计病斑面积，计算发病枣果的病情指数。
1.7数据分析
选用Excel和DPS软件包进行数据统计分析，采用Duncan氏新复极差法（P<0.05，P<0.01）进行显著性分析。
2结果与分析
2.1枣果黑斑病菌在不同枣树品种上的发生情况
田间调查发现，枣果黑斑病菌在不同枣树品种上发病情况差异显著，主栽品种上病害发生较为普遍，少数品种未受到危害（表3）。‘骏枣’上病害发病率最高，达34.35%，病情指数为8.34；其次是‘壶瓶枣’，发病率为30.12%，病情指数为4.85；在‘圆脆枣’、‘马牙枣’和‘酸枣’上病害未发生；而在‘灰枣’、‘赞皇枣’、‘冬枣’、‘相枣’、‘板枣’、‘鸡心枣’和‘金丝枣’上发病率和病情指数均较低。
不同地区的同一枣树品种上病害发生情况差异不大。‘骏枣’在阿克苏地区的发病率（34.35%）、病情指数（8.34）略高于和田地区（32.65%/8.26）；‘壶瓶枣’在阿克苏的发病率（30.12%）稍高于和田地区（21.38%），但是病情指数相差不大；不同地区‘灰枣’的发病率以及病情指数相差无几。总体来看，病害在阿克苏地区的发生情况相对和田地区严重，主要由于枣果收获期阿克苏地区的降雨量较和田地区丰富，田间湿度较大，病害的发生相对严重。
2.2病原菌不同类型接种体对骏枣枣果的致病性
采用菌饼、孢子悬浮液和菌丝3种接种体对‘骏枣’枣果开展致病性测定。结果表明不同接种体对枣果的致病性存在差异（图1）。接种菌饼的枣果发病最早，在接种后2 d枣果胴部上出现病斑，接种后10 d病斑停止扩展，直径为17 mm；接种孢子悬浮液的枣果接种后2 d开始发病，病斑扩展较慢，接种后10 d病斑停止扩展，直径为9 mm；接种菌丝的枣果接种后3 d开始表现明显病状，接种10 d病斑后停止扩展，直径为8 mm。采用菌饼接种的枣果发病较快且病斑扩展速度快，故选择菌饼作为最优接种体。
2.3病原菌对不同枣树品种枣果的致病性
病原菌接种于不同品种的枣果上均能致病，且不同品种的枣果发病症状一致，对照不发病。枣果接种2～3 d后开始出现水渍状圆形或椭圆形病斑，病斑逐渐扩大且变黑变硬，病斑内部果肉分离（图2）。病原菌对不同品种的枣果致病性差异显著（表4），致病性依次为：‘骏枣’>‘壶瓶枣’>‘哈密枣’>‘相枣’>‘板枣’>‘酸枣’>‘圆脆枣’>‘鸡心枣’=‘金丝枣’>‘赞皇枣’=‘灰枣’=‘冬枣’=‘马牙枣’；病原菌对‘骏枣’的致病性最强，病情指数为58，其次是‘壶瓶枣’，病情指数为40，对‘马牙枣’、‘灰枣’、‘赞皇枣’和‘冬枣’的致病性最弱，病情指数均为20。
供试枣果中，‘冬枣’、‘鸡心枣’、‘马牙枣’和‘酸枣’在接种后3 d发病，其他枣果在接种后2 d发病；所有供试品种在接种后第10天病斑停止扩展。病原菌在不同品种枣果中的病斑扩展情况存在差异。接种后4～10 d时间段内，‘赞皇枣’、‘鸡心枣’、‘灰枣’、‘圆脆枣’等品种上病斑持续缓慢扩展；‘哈密枣’在接种后4～7 d相对扩展较慢，接种后7～10 d扩展较快；‘骏枣’、‘壶瓶枣’和‘板枣’在接种后4～10 d内持续快速扩展。
3结论与讨论
本研究通过调查不同枣树品种枣果黑斑病的田间发生情况，发现‘骏枣’和‘壶瓶枣’上病害发生较为严重。病原菌对新疆13个枣树品种枣果的致病性测定结果表明，病原菌对‘骏枣’枣果的致病性最强，其次为‘壶瓶枣’，对‘冬枣’和‘马牙枣’的致病性最弱。病害在大果型的枣果上发生严重，小果型品种上相对较轻，可能与不同品种枣果的生理结构有关。
国内学者开展枣果黑斑病相关研究时，多数选用孢子悬浮液和菌饼作为接种体[3，89， 21]。本试验探讨了不同接种体对致病性的影响，结果表明直接在伤口上放置菌饼的接种效果最好。
从已有报道来看，国内红枣产区枣果黑斑病的发生情况不尽相同。山东沾化枣果黑斑病主要侵染‘冬枣’的叶片和果实，其病果率一般在30%，最严重达80%以上[22]。山西太谷县和交城县的‘骏枣’和‘壶瓶枣’上病害发病率在60%左右，严重时达到80%以上[10]。本研究通过对新疆阿克苏和和田地区枣园的调查发现，‘骏枣’和‘壶瓶枣’的发病最为严重，发病率在30%左右，病原菌只危害‘冬枣’的果实，且发病率极低（0.46%）。由此可见，不同地域枣果黑斑病的发生情况差异较大，可能与地区间的气候和地理环境有关[23]。
参考文献
[1]曲泽洲，王永蕙. 中国果树志·枣卷[M]. 北京： 中国农业出版社， 1993： 2332.
[2]漆联全. 新疆红枣产业的现状、要求及其发展趋势[J]. 新疆农业科学，2010（S2）：812.
[3]向征，钟聪慧，胡军，等. 新疆枣果黑斑病病原鉴定[J]. 新疆农业科学，2013（5）：845850.
[4]蔡龙. 红枣黑斑病发病研究及药剂防治试验[J]. 山西果树，2013（3）：35.
[5]Gupta P C， Madaan R L. Diseases of fruits from Haryana—a new leaf spot disease of Ziziphus mauritiana Lamk.[J]. Current Science，1977，46（7）：237238.
[6]刘云龙，张凌祥，张忠义，等.国内一种果树新病害——枣叶黑斑病的初步研究[J].云南农业大学学报，1988（1）：1820.
[7]袁高庆，赖传雅. 台湾大青枣黑斑病和灰霉病发生为害初报[J]. 广西植保，2001（3）：30.
[8]吴玉柱，季延平，刘会香，等.冬枣黑斑病病原菌的鉴定[J]. 中国森林病虫，2005（2）：13.
[9]赵文华，李一泉. 枣树黑斑病在云南省红河州发生的主要症状、病原分析、发生规律及综合防治策略[J]. 石河子大学学报（自然科学版），2004（S1）：152155.