【摘 要】
：
目的利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1).方法将15 kD人IGF-1(hIGF-1)前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒(BmN
【机 构】
：
南京医科大学,中国农业科学研究院镇江蚕业,荷兰Utrecht大学
论文部分内容阅读
目的利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的可溶性分泌型重组人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-1).方法将15 kD人IGF-1(hIGF-1)前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒(BmNPV)转移载体pBakPAK8中,经与野生型病毒DNA共转染家蚕细胞后,通过体内同源重组的方式获得重组病毒BmNPV/IGF-1.以BmNPV/IGF-1感染5龄家蚕幼虫,分别在感染后24、48、72、96、108、120 h提取家蚕血淋巴液,以ELISA法测定不同时象家蚕血中IGF-1浓度,采用Western-blot分析鉴定IGF-1免疫学活性,MTT法观察其对NIH3T3细胞增殖的影响.结果 ELISA测定显示,BmNPV/IGF-1感染家蚕幼虫后,72 h起蚕血中IGF-1浓度随感染时间延长而逐渐增高(19.09～23.36 μg/ml),120 h IGF-1含量达到最高值(23.36 μg/ml),Western-blot分析发现表达产物在蚕体内被加工成7.5 kD成熟hIGF-1,并对NIH3T3细胞具有良好促增殖效应,其促细胞增殖能力明显优于来源于E.coli的IGF-1标准品.结论具有免疫学活性和生物学活性的rhIGF-1能够在家蚕幼虫虫体中获得高效表达.
其他文献
在简述我国地方猪保护利用工作所取得的显著成绩与存在的主要问题基础上,笔者就当前这一工作提出了一些看法与建议,供决策部门、保种场、保护区以及相关企业参考.
采用响应面法对枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)产葡聚糖内切酶(CMCase)的液体发酵培养基进行优化.用单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源、氮源和无机盐;通过中心
目的:克隆并体外表达HPV58E6,为E6致癌作用和疫苗的研究奠定基础.方法:通过PCR方法从HPV58全基因克隆中扩增出HPV58E6基因片段,利用基因重组技术,将其克隆至真核表达质粒pcDN
pJW566是从丹麦乳酪生产菌株Lactococcus lactis subsp.cremorisW56中分离到的,一个22.4kb、具有限制和修饰作用的质粒.内切酶Cla Ⅰ对pJW566 不完全消化,所得片段与来自于质
根据mRNA差异显示分析,由单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ型结合人成纤维细胞膜受体后2 h诱导产生的早期基因cDNA库中,分离到一个编码具有SR蛋白结构特征的新基因,该基因长904bp.编码产
为探讨软骨基质成分Ⅱ,Ⅹ型胶原在软骨内成骨过程中可能起的作用,研究了在Ⅱ或Ⅹ型胶原存在下,以骨基质Ⅰ型胶原为晶种时钙磷酸盐晶体生长的动力学过程.用FT-IR方法分析了固
目的研究HUMARA基因多态性在陕西地区老年动脉粥样硬化(AS)人群中分布规律及其该位点与AS遗传易感性的关系. 方法应用多聚酶链反应( PCR)对96例老年AS患者及92例非AS老年人HU
将衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)肌动蛋白(actin)基因(cDNA)与绿色荧光蛋白(green fluore- scence protein, GFP)基因融合后, 分别构建到原核和植物表达载体中, 并在BL21p
蜘蛛拖丝是已知性能最好的天然纤维 (Kaplan et al.,1994; Mello et al.,1994).与其它结构蛋白,如胶原蛋白和弹性蛋白相似,丝蛋白具有自装配性质,通过二级结构调节,以提供机
Cr6+污染对水鳖超微结构的影响主要表现在:胞间连丝呈现不同程度的断裂;细胞核出现各种各样的变形;叶绿体膨胀,其基粒解体.细胞损伤程度与Cr6+培养浓度呈正相关.Cr6+对水鳖、