【摘 要】
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[目的]探索一种聚乙二醇修饰尿酸酶后的纯化方法,提高分离纯化效率,保留酶的活性,适用性广,便于扩大生产.[方法]60％饱和度硫酸铵溶液初步纯化,阴离子柱层析,最后用分子排阻法
【机 构】
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[目的]探索一种聚乙二醇修饰尿酸酶后的纯化方法,提高分离纯化效率,保留酶的活性,适用性广,便于扩大生产.[方法]60％饱和度硫酸铵溶液初步纯化,阴离子柱层析,最后用分子排阻法精纯.[结果]初步纯化酶活达到110U,精纯之后,聚乙二醇修饰尿酸酶纯度可达100％,NHS和PEG残留被纯化分离,平均每个尿酸酶单体被10个PEG稳定修饰.[结论]经过优化后的纯化方法,阴离子层析去除NHS、未反应的尿酸酶,凝胶过滤层析捕获PEG修饰的尿酸酶,反相纯度检测和高分子纯度检测聚乙二醇修饰尿酸酶蛋白纯度达100％.PEG残留、NHS残留检测数据为0.
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