PcDNA3.1/hTSHRa重组体的构建

来源 :天津医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：swordhero

【摘要】

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目的:构建重组体pcDNA3.1/hTSHRa.方法:提取人正常甲状腺组织总RNA,逆转录后进行PCR,将纯化的扩增产物hTSHRa与表达载体pcDNA3.1TOPO连接后转化TOP10 E.coli感受态菌.重组质

【作者】

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朱云娟姚智赵紫琴李兰英陆凤先叶静

【机构】

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天津医科大学免疫学教研室,天津医科大学病理生理学教研室,天津医科大学内分泌学研究所

【出处】

：

天津医科大学学报

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

：

促甲状腺激素受体基因表达 pcDNA3.1 Graves'病

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目的:构建重组体pcDNA3.1/hTSHRa.方法:提取人正常甲状腺组织总RNA,逆转录后进行PCR,将纯化的扩增产物hTSHRa与表达载体pcDNA3.1TOPO连接后转化TOP10 E.coli感受态菌.重组质粒经PCR、Hind Ⅲ酶切和核苷酸序列测定方法进行鉴定.结果:PCR扩增得到hTSHR膜外区N端753bp的基因片段hTSHRa.该片段与表达载体pcDNA3.1TOPO连接后转化TOP10 E.coli感受态菌.重组质粒经PCR、Hind Ⅲ酶切和核苷酸序列测定方法鉴定证实hTSHRa片段插入序列和方向正确.结论:hTSHRa片段插入真核表达载体pcDNA3.1TOPO,插入序列和插入方向正确,可用于后续基因表达.

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