目的 探讨白藜芦醇(Res)诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制.方法 应用不同浓度的Res(0、4、8、16、32、48 mg/L)处理体外培养Mum2c细胞,24、48、72 h后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖.应用不同浓度的Res(32、40、48 mg/L)处理Mum2c细胞,24h后采用流式细胞仪膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)／碘化丙锭(PI)双标法检测细胞凋亡,线粒体膜电位JC-1荧光检测观察细胞凋亡,检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性,免疫细胞化学法检测B淋巴细胞／白血病-2(bel-2)表达.结果 CCK-8检测结果显示16 mg/L以上浓度的Res作用24、48、72 h后Mum2c增殖与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测显示.Res(32、40、48 mg/L)作用组凋亡率[(7.00±0.98)％、(11.87 ±0.60)％、(15.39±1.04)％],与阴性对照组[(2.02±0.84)％]比较差异有统计学意义(P＜0.05).JC-1荧光显微镜下观察,可见随浓度增加Res作用组低红染色细胞比例[(7.42±0.53)％、(13.12±0.83)％、(15.57±0.53)％]逐渐增加,与阴性对照组[(3.57±0.53)％]比较差异有统计学意义(P＜0.05).各Res作用组Caspase-3的吸光度(A)值(0.246±0.015、0.566±0.027、0.778 ±0.018),与阴性对照组(0.151 ±0.010)比较差异有统计学意义(P＜0.05).bcl-2阳性细胞百分率[(49.60±1.51)％、(38.00±1.26)％、(26.67±1.21)％],与阴性对照组[(61.33±1.21)％]比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Res能够诱导人脉络膜恶性黑色素瘤Mum2c细胞凋亡,其作用机制与线粒体膜电位被破坏,Caspase-3活性增强,bcl-2表达水平降低有关。
白藜芦醇诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞凋亡及其机制研究
【摘 要】
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目的 探讨白藜芦醇(Res)诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制.方法 应用不同浓度的Res(0、4、8、16、32、48 mg/L)处理体外培养Mum2c细胞,24、48、72 h后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖.应用不同浓度的Res(32、40、48 mg/L)处理Mum2c细胞,24h后采用流式细胞仪膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)／
【机 构】
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221002江苏,徐州医学院附属医院眼科,221002江苏,徐州医学院附属医院眼科,221002江苏,徐州医学院附属医院眼科
【出 处】
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中华实验外科杂志
【发表日期】
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2012年29期
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