目的 探讨白藜芦醇(Res)诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制.方法 应用不同浓度的Res(0、4、8、16、32、48 mg/L)处理体外培养Mum2c细胞,24、48、72 h后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖.应用不同浓度的Res(32、40、48 mg/L)处理Mum2c细胞,24h后采用流式细胞仪膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双标法检测细胞凋亡,线粒体膜电位JC-1荧光检测观察细胞凋亡,检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性,免疫细胞化学法检测B淋巴细胞/白血病-2(bel-2)表达.结果 CCK-8检测结果显示16 mg/L以上浓度的Res作用24、48、72 h后Mum2c增殖与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测显示.Res(32、40、48 mg/L)作用组凋亡率[(7.00±0.98)%、(11.87 ±0.60)%、(15.39±1.04)%],与阴性对照组[(2.02±0.84)%]比较差异有统计学意义(P<0.05).JC-1荧光显微镜下观察,可见随浓度增加Res作用组低红染色细胞比例[(7.42±0.53)%、(13.12±0.83)%、(15.57±0.53)%]逐渐增加,与阴性对照组[(3.57±0.53)%]比较差异有统计学意义(P<0.05).各Res作用组Caspase-3的吸光度(A)值(0.246±0.015、0.566±0.027、0.778 ±0.018),与阴性对照组(0.151 ±0.010)比较差异有统计学意义(P<0.05).bcl-2阳性细胞百分率[(49.60±1.51)%、(38.00±1.26)%、(26.67±1.21)%],与阴性对照组[(61.33±1.21)%]比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 Res能够诱导人脉络膜恶性黑色素瘤Mum2c细胞凋亡,其作用机制与线粒体膜电位被破坏,Caspase-3活性增强,bcl-2表达水平降低有关。
白藜芦醇诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞凋亡及其机制研究
【摘 要】
:
目的 探讨白藜芦醇(Res)诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制.方法 应用不同浓度的Res(0、4、8、16、32、48 mg/L)处理体外培养Mum2c细胞,24、48、72 h后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖.应用不同浓度的Res(32、40、48 mg/L)处理Mum2c细胞,24h后采用流式细胞仪膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/
【机 构】
:
221002江苏,徐州医学院附属医院眼科,221002江苏,徐州医学院附属医院眼科,221002江苏,徐州医学院附属医院眼科
【出 处】
:
中华实验外科杂志
【发表日期】
:
2012年29期
论文部分内容阅读
其他文献
目的 观察在ECs器官保存液中,脂质体介导的核因子-κB(NF-κB)诱捕物寡聚核苷酸(ODN)复合物对大鼠移植肾黏附分子mRNA表达的影响.方法 建立大鼠原位移植肾模型,利用4℃的含1.0 μmol/L的NF-κB诱捕物ODN脂质体复合物的ECs灌注移植肾,低温保存6h后移植到受体大鼠;80只大鼠分为4组:手术组(Control组)、ECs组、诱捕DON(decoy ODN)组、错配ODN(sc
目的 观察Twist基因促进人结肠癌细胞株SW480上皮间质转化及对细胞侵袭能力的影响.方法 构建Twist真核表达质粒并转染至SW480细胞.检测3组SW480细胞转染前后Twist、上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的mRNA和蛋白表达.Transwell小室检测SW480结肠癌细胞的侵袭能力.结果 转染Twist基因的SW480细胞Twist mRNA和蛋白
我们利用Westernblot分析、逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)方法和免疫组织化学技术,检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中胰腺癌抑癌基因4(DPC4)/Smad4和转化生长因子-BⅡ型受体(TBR11)的表达,探讨其与非小细胞肺癌(NSCLC)发病的关系。
期刊
目的 探讨膀胱癌特异性核基质蛋白-4(BLCA-4)在膀胱癌患者早期诊断及术后监测肿瘤复发中的意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测良性病变组、对照组和实验组患者术前及术后1、6个月和1年尿液中BLCA-4的表达.结果 实验组患者尿液中BLCA-4的含量中位数为39.48 A/μg protein,敏感性为93.33%,良性病变组和对照组分别为2.19 A/μg protein和0.
目的 观察微小RNA(miRNA)在酒精缺血坏死性与正常股骨头骨组织的表达变化,探讨miRNA基因在两者中的变化关系.方法 分别对5例酒精性股骨头与5例正常股骨头骨组织进行miRNA基因芯片检测,可见有上调基因has-miR-29a-st和下调基因has-miR-486-5p-st,分别对上调和下调基因行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR).结果 miRNA基因芯片共检测酒精缺血坏死性与正常股骨头
目的 观察靶向Ras同源类似物C(RhoC)的短发卡RNA(shRNA)质粒载体构建及RhoC基因沉默对人恶性黑色素瘤A375细胞侵袭、转移能力的影响.方法 构建3条质粒载体pGPU6/Neo-RhoC shRNA1、shRNA2和shRNA3,利用脂质体LlpofectamlneTM 2000转染A375细胞,Western blot检测转染后RhoC蛋白表达,并将最佳靶向序列质粒转染A375细
目的 探讨Notch信号通路与磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3 K/Akt)信号通路在膀胱癌中的作用及其机制.方法 分别通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测Notch信号通路与PI3 K/Akt信号通路的关键因子在36对膀胱癌及癌旁组织中的表达,然后采用Notch信号通路抑制剂(2S)-N-N-(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰-2-苯基甘氨酸
目的 探讨姜黄素对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)肺泡Ⅱ型细胞(AT Ⅱ)的保护作用及其机制.方法 建立大鼠肺缺血再灌注损伤长期存活模型,研究分为假手术组、缺血再灌注损伤(I/R)组、姜黄素低浓度组和姜黄素高浓度组;分别于开胸后、肺门阻断后0、4h、1、3、7d5个时间点收集血及肺组织标本,检测各组如下指标:血氧分压(Pa02)、肺组织苏木素-伊红(HE)染色、肺组织肺泡表面活性物质C(SP-C)
目的 检测骨骼肌组织学的变化,探讨不同修复方式对失神经骨骼肌的影响.方法 将32只普通级SD大鼠左上肢肌皮神经切断,随机分成2组,非神经寄养组(16只);神经寄养组(16只),将胸内侧神经分支的近端移位于寄养组肌皮神经的远端,6周后对两组大鼠行二期神经修复.分别于修复术后6、12周测量两组大鼠双上肢肌肉湿重和肌纤维横截面积,比较各项指标的恢复率.结果 神经修复术后6、12周神经寄养组的肌肉湿重恢复
目的 观察共济失调-毛细血管扩张症致病基因(ATM)的RNA干扰对恶性人脑胶质瘤细胞放射敏感性的影响.方法 通过RNA干扰技术抑制恶性人脑胶质瘤细胞株U87细胞的ATM基因表达,构建U87LA.1细胞.应用免疫组织化学的方法观察ATM蛋白在U87和U87L4.1细胞中的表达;以细胞存活分数(SF)来评估U87和U87L4.1细胞的放射敏感性.结果 免疫组织化学法显示U87细胞中的ATM蛋白表达阳性