ROCK-Ⅱ基因shRNA质粒表达载体的构建与鉴定

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目的构建表达Rho激酶(ROCK)-Ⅱ特异性siRNA的重组质粒。方法按照Elbashir等设计原则和siRNA表达载体的要求,利用Ambion公司在线siRNATatgetfinder软件,设计带有BamHI、BbsI酶切黏性末端、终止识别序列和LOOP环的shRNA,并将其克隆入载体pGPU6/GFP/Neo,构建成ROCK-Ⅱ特异siRNA重组质粒,然后进行酶切鉴定及基因测序。结果设计的shRNA成功克隆入载体pGPU6/GFP/Neo,构建成ROCK-Ⅱ特异siRNA重组质粒,酶切鉴定及基因测序表
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