【摘 要】
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基于NLRP3炎性小体通路研究王不留行多糖治疗细菌性膀胱炎的作用机制.在课题组前期建立的急性尿路感染大鼠模型基础上,给予王不留行多糖治疗,收集尿液及膀胱组织,使用酶联免
【机 构】
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中国中医科学院中药研究所,北京100700;南方医科大学药学院,广东广州510515;中国中医科学院中药研究所,北京100700;天津中医药大学中医药研究院,天津300193;中国中医科学院中药研究所
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基于NLRP3炎性小体通路研究王不留行多糖治疗细菌性膀胱炎的作用机制.在课题组前期建立的急性尿路感染大鼠模型基础上,给予王不留行多糖治疗,收集尿液及膀胱组织,使用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠尿液中白细胞介素-10(interleukin-10,IL-1O)的含量变化,使用Western blot法及免疫荧光染色法检测大鼠膀胱组织中音猥因子(sonic hedgehog,SHH)的表达、NLRP3炎性小体的结构组成蛋白NOD样受体热蛋白结构域3(NOD-like receptor thermoprotein domain 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck like protein,ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶1(pro-caspase-1)表达及激活的情况,使用RT-PCR法检测大鼠膀胱组织中Toll样受体通路的表达,使用live/dead试剂盒及化学显色法检测尿路上皮5637细胞体外感染大肠杆菌后的死亡情况及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放情况.结果 表明,大鼠感染尿路致病性大肠杆菌后膀胱组织SHH、NLRP3炎性小体及Toll样受体的表达均明显上调,NLRP3炎性小体明显激活;王不留行多糖可明显增加尿液中IL-10的浓度,抑制膀胱组织SHH、NLRP3炎性小体及Toll样受体的表达,并抑制NLRP3炎性小体的激活;5637细胞体外感染大肠杆菌后细胞大量死亡并引起LDH大量释放,王不留行多糖可明显抑制5637细胞的死亡及LDH的释放.王不留行多糖可通过抑制Toll样受体通路抑制NLRP3炎性小体的表达及激活从而改善膀胱损伤.
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