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目的
观察前列腺癌细胞中微小RNA(miRNA,miR)-221的表达及其对前列腺癌细胞侵袭力的影响。
方法应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-221在前列腺正常细胞株与前列腺癌细胞株中表达的差异,利用细胞转染构建miR-221过表达和抑制细胞株,再通过细胞迁移实验检测细胞侵袭力的变化;使用荧光素酶报告实验验证miR-221与细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)基因的直接调控关系,再采用Western blot检测细胞中SOCS1基因表达水平的变化。
结果RT-qPCR检测细胞株可见miR-221在PC3、LNCaP和DU145 3种前列腺癌细胞株中表达量(6.51、7.52和8.03)均比前列腺正常细胞株表达量(12.12)低(F=235.852,P=0.000),其中两两比较差异也有统计学意义。细胞迁移实验结果显示,过表达miR-221的前列腺肿瘤细胞迁移速度显著慢于对照组(25.3 h比17.8 h)。荧光素酶报告实验显示,miR-221能明显抑制SOCS1-3’UTR的荧光素酶活性(P=0.006)。过表达miR-221后,PC3细胞中SOCS1的蛋白表达下调(P=0.035)。
结论miR-221负调控SOCS1能抑制前列腺癌细胞的迁移。