观察盐诱导激酶1(SIK1)对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的调控作用。
方法将抑制剂转染肝癌MHCC97-L和HEP3B细胞株构建SIK1敲低组,通过实时聚合酶链反应(qPCR)检测SIK1的表达;噻唑蓝(MTT)法检测SIK1在1、2、3、4、5 d时对细胞增殖的影响;细胞周期实验检测SIK1对细胞G1、S、G2期的影响;细胞凋亡实验检测细胞侵袭能力;划痕实验检测6、24、48 h时细胞的迁移能力。
结果SIK1在肝癌MHCC97-L和HEP3B细胞中相对表达低于正常肝脏细胞(0.51±0.01、0.33±0.02,tMHCC97-L=19.630,P=0.000;tHEP3B=24.940,P=0.000);转染SIK1抑制物后,肝癌MHCC97-L和HEP3B细胞内SIK1相对表达量明显降低(0.39±0.02、0.51±0.03,tMHCC97-L=11.479,P=0.000;tHEP3B=9.543,P=0.001);敲低SIK1后,MTT实验结果显示,明显促进MHCC97-L和HEP3B细胞的增殖(1.20±0.06比0.90±0.07,tMHCC97-L=5.630,P=0.005;1.09±0.11比0.63±0.05,tHEP3B=6.460,P=0.003);细胞周期实验结果显示:S期细胞比例高于对照组[(24.77±0.99)%比(17.22±1.01)%,tMHCC97-L=9.280,P=0.001;(21.63±0.94)%比(15.32±0.88)%,tHEP3B=8.460,P=0.001];G2细胞比例高于对照组[(16.75±0.50)%比(14.94±0.64)%,tMHCC97-L=3.860,P=0.018;(15.99±0.51)%比(13.97±0.44)%,tHEP3B=5.170,P=0.007],促进细胞从G1期向S期转变;细胞凋亡实验显示:MHCC97-L和HEP3B细胞凋亡率下降[(1.91±0.10)%比(3.27±0.31)%,tMHCC97-L=7.180,P=0.002;(2.01±0.14)%比(3.81±0.13)%,tHEP3B=16.600,P=0.000];划痕实验结果显示:明显促进MHCC97-L和HEP3B细胞迁移[(202.00±15.61)比(285.33±10.07) μm、(229.33±13.61)比(321.33±16.04) μm,tMHCC97-L=7.770,P=0.001;tHEP3B=7.570,P=0.002],差异有统计学意义。
结论降低SIK1的表达促进了MHCC97-L和HEP3B细胞株增殖、侵袭和迁移的作用。