甲状腺髓样癌家系RET基因点突变质粒及稳定细胞系构建

来源 :中国耳鼻咽喉头颈外科 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chinetman
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目的构建中国大陆甲状腺髓样癌RET基因常见突变位点的质粒并验证其表达。方法分析中国大陆甲状腺髓样癌家系RET基因,进行RET基因外显子高通量"二代"测序分析。体外构建RET基因相应位点突变并研究在NIH3T3细胞中的表达水平。结果通过对野生型RET质粒进行点突变PCR、克隆测序后,成功获得相应位点点突变慢病毒质粒。经过慢病毒感染NIH3T3细胞,Western Blot验证目的基因为稳定表达。结论成功构建了载有RET基因突变的稳定细胞系,为研究RET不同位点突变提供了良好平台。
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