【摘 要】
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目的通过研究三氧化二砷对人肝癌细胞株HepG2活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)水平、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨三氧化二砷诱导肝
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院环境卫生学教研室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.81172632,No.81372945)资助
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目的通过研究三氧化二砷对人肝癌细胞株HepG2活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)水平、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的机制。方法分别采用0、2.5、5和10μmol/L三氧化二砷处理HepG2达24h后,MTT实验测定细胞存活率(另增25、50μmol/L浓度组),流式细胞术检测细胞凋亡水平,DCFH-DA荧光探针测定细胞内ROS水平,5,5-二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)比色法检测细胞中GSH含量,蛋白印记检测γ-GCS催化亚基GCLC和调节亚基GCLM以及核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达水平。结果随着三氧化二砷染毒浓度的增加,HepG2细胞凋亡率、ROS水平和Nrf2蛋白表达均增加(P<0.05),而细胞存活率、GSH含量、GCLC和GCLM蛋白表达量均降低(P<0.05)。结论三氧化二砷通过诱导细胞产生ROS,抑制γ-GCS的表达以及减少GSH合成,从而诱导人肝癌细胞凋亡。
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