猪传染性胸膜肺炎放线杆菌APXⅡ基因特异片段的克隆和表达

来源 :浙江农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangzhehang
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将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌APXⅡ的一段毒素基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET-APXⅡ,并将其转化到受体菌BL21中,诱导剂IPTG进行诱导表达,4h后达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白大小约为31kD。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应,说明该表达蛋白具有免疫原性,这为下一步用此表达蛋白作为抗原,对APP进行诊断试剂的研制和基因工程疫苗的研究提供科学依据。
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