【摘 要】
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目的:获得小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)全长编码区基因.方法:采用RT-PCR技术,从BALB/c鼠肝组织总RNA中扩增PGRP-L编码区基因片段,将其插入pUCm-T载体,以PCR和测序进行鉴
【机 构】
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南方医科大学免疫学教研室,广东,广州,510515
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目的:获得小鼠长型肽聚糖识别蛋白(mPGRP-L)全长编码区基因.方法:采用RT-PCR技术,从BALB/c鼠肝组织总RNA中扩增PGRP-L编码区基因片段,将其插入pUCm-T载体,以PCR和测序进行鉴定.结果:从BALB/c小鼠肝脏cDNA中,分别以Primer-F和Primer-R1、Primer-F1和Primer-R为引物对进行PCR,扩增得到约1 050 bp的上游基因片段和约540 bp的下游基因片段.以纯化的上、下游片段为模板,Primer-F和Primer-R为引物进行PCR,扩增获得约1 600 bp的DNA片段,并将其克隆至pMD18-T载体获得重组质粒pMD18-mPGRP-L.鉴定结果表明,mPGRP-L编码区基因全长1 593 bp,与GenBank中mPGRP-L cDNA比较仅2个位置的核苷酸不同,两者的同源性为99.87%.结论:成功地克隆了mPGRP-L的cDNA,为mPGRP-L分子的研究奠定了一定基础.
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