【摘 要】
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目的在大肠埃希菌中表达人诺如病毒(norovirus,NoV)NS6非结构蛋白,为了获得高纯度且具有酶活性的人诺如病毒NS6蛋白。方法将NoV NS6蛋白基因克隆至原核表达载体pDE1中,转化至E. coli BL21感受态细胞中进行表达,产物经亲和及分子筛层析纯化。NS6蛋白在37 ℃条件下,酶切融合蛋白15VP1-6P,检测其酶切活性。结果NS6蛋白在大肠埃希菌中获得了稳定、高效表达,纯化后纯
【机 构】
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内蒙古医科大学基础医学院免疫学专业,呼和浩特 010000,内蒙古医科大学基础医学院免疫学专业,呼和浩特 010000,国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制
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目的在大肠埃希菌中表达人诺如病毒(norovirus,NoV)NS6非结构蛋白,为了获得高纯度且具有酶活性的人诺如病毒NS6蛋白。
方法将NoV NS6蛋白基因克隆至原核表达载体pDE1中,转化至E. coli BL21感受态细胞中进行表达,产物经亲和及分子筛层析纯化。NS6蛋白在37 ℃条件下,酶切融合蛋白15VP1-6P,检测其酶切活性。
结果NS6蛋白在大肠埃希菌中获得了稳定、高效表达,纯化后纯度可达95%以上。NS6蛋白能够切割含3C酶切位点的融合蛋白。
结论在大肠埃希菌中成功表达了具有酶切活性的NoV非结构蛋白NS6,为进一步研究NoV的致病机制奠定了基础。
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