腹泻新病原艰难梭菌DNA提取方法的比较研究

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目的:比较提取高质量艰难梭菌基因组总DNA的方法.方法:采用4种不同方法提取艰难梭菌基因组DNA,比较作为模板用于扩增艰难梭菌看家基因磷酸丙糖异构酶(tpi)基因的优缺点.结果:除沸水浴法,其他3种方法制备的艰难梭菌DNA均能成功用作PCR扩增的模板.CTAB/NaCl法进行提取可有效去除多糖成分,但操作要求较高.碱裂解法操作简便、省时、成本低经济可靠,提取的DNA量及纯度较合适;试剂盒抽提出的产物纯度和产量明显高于CTAB/NACL、碱裂解法(P<0.05),但成本高.结论:四种方法各具优缺点,应根据实验室条件和实验要求进行选择.
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