不同转染介质对狂犬病病毒糖蛋白基因免疫的效应

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将狂犬病病毒糖蛋白(RGP)cDNA BglⅡ片段(1.67 kb)分别克隆进质粒pGFP-Cl、pSV2 -dhfr和pcDNA3,构建了重组质粒pGFP-C1-RGP、pSV2-RGP和pcDNA3-RGP,通过脂质体和聚乙烯亚胺(PEI)包裹后分别转染BHK-21细胞和乳鼠脑内接种,3种重组质粒均能表达出RGP .表达水平高低依次为pGFP-C1-RGP>pcDNA3-RGP>pSV2-RGP.3种重组质粒分别以全裸质粒、质粒-脂质体、质粒-PEI形式,经骨骼肌免疫小鼠,间接ELISA检测.结果显示,免疫鼠血清中特异性抗体水平明显高于对照组;80%免疫小鼠能抵抗狂犬病病毒强毒的攻击.全裸质粒免疫诱生的抗体水平同其剂量相关;而以PEI或脂质体作为转染介质、质粒接种量超过20 μg时,诱生抗体水平不再随质粒剂量增大而显著变化.质粒免疫后150 d采用PCR仍然能从注射部位检测到RGP基因的存在.
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