【摘 要】
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目的 基于RP-HPLC法对扶正补血食疗方中胶原蛋白含量进行测定，并通过正交试验优选出扶正补血食疗方中胶原蛋白的最佳提取方法。方法 于2021年12月至2022年1月将样品以6 mol/L盐酸于110℃水解24 h，利用AQC试剂进行衍生，采用Diamonsil-Cl8色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm），以流动相A：无水乙酸钠11.48 g，三乙胺1.72 g,EDTA 1 mg，溶于1
【基金项目】
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江苏省研究生实践创新计划项目（SJCX21-0665）； 2021年度江苏省卫生健康委医学科研项目指导性项目（Z2021065）； 江苏省研究生科研创新计划项目（KYCX21-1803）； 江苏省中医药科技发展计划项目（YB2020004）； 南京中医药大学“江苏
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目的 基于RP-HPLC法对扶正补血食疗方中胶原蛋白含量进行测定，并通过正交试验优选出扶正补血食疗方中胶原蛋白的最佳提取方法。方法 于2021年12月至2022年1月将样品以6 mol/L盐酸于110℃水解24 h，利用AQC试剂进行衍生，采用Diamonsil-Cl8色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm），以流动相A：无水乙酸钠11.48 g，三乙胺1.72 g,EDTA 1 mg，溶于1 L水中，用磷酸调pH为4.95；流动相B：乙腈水溶液（体积分数60%），梯度洗脱；柱温37℃；检测波长254 nm；流速1 mL/min；进样量10μL。以羟脯氨酸含量为评价指标，考察煎煮时间、料水比、煎煮温度对胶原蛋白含量的影响，优化其制备工艺。结果 羟脯氨酸在10～500 mg/L浓度范围内线性关系良好（Y=0.036 5X+0.517 3,R~2=0.999 1），平均回收率95.11%，相对标准偏差（RSD）为1.12%（n=6）。猪蹄胶原蛋白的最佳提取工艺为：A3B1C3，即加热温度为100℃，料水比为1∶8，提取时间为3 h。结论 该方法快速准确，稳定可行，可作为扶正补血食疗方中胶原蛋白含量的测定方法，为该产品质量控制及临床应用提供科学依据。
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