【摘 要】
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目的:探讨热休克转录因子1(HSF-1)抑制高迁移率族蛋白1(HMGB1)引起炎症反应的作用及机制.方法:RAW264.7细胞分别转染含HSF-1的质粒(HSF-1过表达组)和空白质粒(阴性对照组)后,
【机 构】
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中南大学湘雅三医院烧伤整形科,湖南长沙410013
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目的:探讨热休克转录因子1(HSF-1)抑制高迁移率族蛋白1(HMGB1)引起炎症反应的作用及机制.方法:RAW264.7细胞分别转染含HSF-1的质粒(HSF-1过表达组)和空白质粒(阴性对照组)后,以无处理的RAW264.7细胞作为空白对照组,用Western blot法检测各组细胞HSF-1蛋白的表达;将以上3组细胞分别用HMGB1(1μg/mL)刺激后,用ELISA法测定TNF-α水平、Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPK)通路和NF-κB通路相关蛋白的表达、非放射性凝胶阻滞(EMSA)检测NF-κB与DNA结合活性.结果:Western blot结果显示,HSF-1过表达组HSF-1蛋白表达量较阴性对照组与空白对照组明显升高(均P＜0.05),而后两组间HSF-1蛋白表达量无统计学差异(P＞0.05);HMGB1作用4h,HSF-1过表达组TNF-α水平较阴性对照组与空白对照组明显降低(均P＜0.05),而后两组间无统计学差异(P＞0.05);HMGB1作用不同时间后,各组细胞MAPK通路相关蛋白p-ERK、p-JNK、p-p38以及NF-κB通路相关蛋白p-IK α-B的表达均无统计学差异(均P＞0.05);EMSA结果显示,HMGB1作用1h后,HSF-1过表达组NF-κB灰度值明显低于阴性对照组与空白对照组(均P＜0.05),而后两组间无统计学差异(P＞0.05).结论:HSF-1过表达可以减少HMGB1引起的TNF-α表达,其分子机制与MAPK通路的活化无关,但与NF-κB和DNA的结合能力有关.
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