目的分离、鉴定宁夏地区某养殖场致奶牛和肉牛死亡的病原菌,并分析其生物学特性。方法采集宁夏地区一奶牛和肉牛养殖场死亡犊牛脏器,进行病原菌的分离培养,采用革兰染色、全自动生化鉴定仪进行菌种鉴定,并进行生物学特性分析,包括培养特性、药物敏感性、毒力基因携带情况以及动物致病性。结果分离纯化得到两株革兰染色阳性菌,分别命名为EF1和EF2,在营养培养基上形成白色、圆形、光滑的菌落,在选择性培养基上形成黑色、圆形、光滑菌落。经全自动生化鉴定仪鉴定EF1为屎肠球菌(Enterococcus faecium),EF2为粪肠球菌(Enterococcus faecalis);药敏试验测定EF1对头孢拉定、庆大霉素和丁胺卡那耐药,EF2对头孢拉定、林可霉素、环丙沙星、土霉素、庆大霉素、磺胺嘧啶和丁胺卡那耐药。PCR检测EF1携带agg、gelE和efaA毒力基因,EF2携带esp、ace、gelE和efaA毒力基因。动物致病性试验中小鼠注射病原菌72h开始死亡,解剖观察两组小鼠脏器(肝、脾、肾)均肿大变黑,且从病变脏器中分离到的细菌均与接种细菌一致。结论该起疫情病原菌为粪肠球菌和屎肠球菌。两分离菌株均具有高耐药性和强致病性,可能与携带多种毒力基因有关。